[发明专利]采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法

权利要求书

1.一种采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其包括以下步骤：

提供一掺有分子探针的第一培养基，所述分子探针包括修饰有荧光分子的报告DNA；

将细胞置入含有第二培养基的培养皿中培养；

在生长的细胞占所述培养皿底部面积的60%-80%时，将该培养皿中的第二培养基吸掉；

把所述第一培养基放入该培养皿中，细胞继续培养2-6个小时后，再将该第一培养基吸掉；

采用激光共聚焦显微镜对细胞成像，利用单光子计数器测量并计算细胞内荧光分子的荧光寿命，得到荧光寿命成像图，根据该荧光寿命成像图检测细胞中的特定mRNA是否存在的信息。

2.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，所述分子探针还包括一纳米金和识别DNA。

3.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，在测量及计算细胞内显示的荧光寿命时，采用激发光激发细胞内报告DNA上修饰的荧光分子，并收集荧光分子发射光。

4.如权利要求3所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，所述激发光的波长为640nm，所述收集的荧光分子发射光的波长范围为690±35nm。

5.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，所述细胞为乳腺癌细胞MDA-MB-231。

6.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，在吸掉第一培养基后并在检测之前，进一步包括采用DAPI染料对细胞核进行染色的步骤。

7.如权利要求6所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，在细胞核经DAPI染料染色后，进一步包括采用激光共聚焦显微镜发射405nm的激发光激发DAPI染料。

8.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，该细胞在培养皿中培养的气相条件为100%的空气，培养温度为37°。

9.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，所述分子探针在第一培养基中的浓度为0.5nM-2nM。

10.如权利要求1所述的采用分子探针检测细胞内特定mRNA的方法，其特征在于，在第一培养基被吸掉后，还包括一清洗细胞的步骤。