[发明专利]一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达和纯化复性方法

说明书

本发明的目的是提供一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达及纯化复性的方法，本发明针对现阶段技术中抗菌肽的合成成本高、工序复杂、合成产量低等不足，本发明利用基因克隆技术获得牙鲆CD59基因成熟肽的编码序列，构建表达载体，转化入表达菌株进行原核表达，后经纯化复性获得有活性的牙鲆CD59抗菌肽。此发明具体可作为饲料添加剂、兽药、防腐剂等应用于水产养殖业。或作为抗生素的替代品用于生物的病害防治。

技术领域

本发明属于抗菌重组蛋白技术领域，具体涉及一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达和纯化复性方法。

背景技术

海水养殖鱼类长期生活在富含微生物的水环境中，非特异性免疫系统是其抵抗外来病菌侵染的重要屏障(Hikima,J.I.,Minagawa,S.,Hirono,I.,&Aoki,T.2001.Molecularcloning,expression and evolution of the japanese flounder goose-type lysozymegene,and the lytic activity of its recombinant protein..Biochimica EtBiophysicaActa,1520(1),35-44.)。补体系统是非特异性免疫的组成部分之一，它在抵抗病原微生物入侵、清除抗原抗体复合物及衰老凋亡的细胞、连接特异性免疫与非特异性免疫方面发挥至关重要的作用(Walport,M.J.(2001).Complement.first of two parts..NEngl J Med,344(14),1058-1066.)。终末裂解途径是调节补体激活以保护机体自身免受补体损伤过程中的一个关键步骤，其中CD59是唯一鉴定出来的、目前研究最为清楚的在终末裂解途径中起作用的膜蛋白，也是表达量最多的膜补体调节蛋白(Miwa,T.,&Song,W.C.2001.Membrane complement regulatory proteins:insight from animal studiesand relevance to human diseases..International Immunopharmacology,1(3),445-459.)。