[发明专利]用于催陈和澄清山西老陈醋的共固定化酶的制备方法有效
| 申请号： | 201610062125.6 | 申请日： | 2016-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN105602929B | 公开（公告）日： | 2019-11-01 |
| 发明（设计）人： | 王如福;王冕;李玉萍;侯红萍;霍乃蕊;张茜;段国锋;王争争;陈嘉;张慧霞;王媛慧;王鈺平;焦玉双;王进龙;张怀敏;李江涌 | 申请（专利权）人： | 山西农业大学 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12J1/00 |
| 代理公司： | 太原华弈知识产权代理事务所 14108 | 代理人： | 李毅 |
| 地址： | 030801 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 澄清 山西 陈醋 固定 制备 方法 | ||
1.一种用于催陈和澄清山西老陈醋的共固定化酶的制备方法,其步骤如下：
(1)制备酯化酶酶液称取一定质量的酯化酶酶粉，用酯化酶质量4-5倍、pH3.6的乙酸-乙酸钠缓冲液将其溶解，将所得上清液倒入容量瓶，将剩余沉渣中再添入pH3.6的乙酸-乙酸钠缓冲液捣研多次，直至全部溶解后将其移入容量瓶中，再用缓冲液稀释到容量瓶刻度，摇匀后多层纱布过滤，制备成浓度为3.5%的酯化酶酶液，备用；
(2)制备糖化酶酶液称取一定质量的糖化酶酶粉，用糖化酶质量4-5倍、pH4.6乙酸-乙酸钠缓冲液将其溶解，将所得上清液倒入容量瓶，将剩余沉渣中再添入pH4.6乙酸-乙酸钠缓冲液捣研多次，直至全部溶解后将其移入容量瓶中，再用缓冲液稀释到容量瓶刻度，摇匀后多层纱布过滤，制备浓度为5%的糖化酶酶液，备用；
(3)称取一定质量的载体材料，用载体材料质量55-60倍的50-60℃水溶解，然后在常温下加入载体材料质量体积比为100:7的(1)制备的酯化酶液，充分搅拌均匀后静置，待气泡完全消失后，在4-5℃条件下，缓慢滴入2%的氯化钙水溶液中，固化1h后生成颗粒物，然后在常温下用两层纱布滤出颗粒物，用pH3.6的乙酸-乙酸钠缓冲液冲洗颗粒物3~5次，除去表面的氯化钙，吸干表面的水分，制成直径2.0-2.3mm的颗粒状固定化酶，备用；
(4)称取(3)制备的一定量固定化酶，按固定化酶与(2)制备的糖化酶液质量体积比为1:1、将固定化酶放入糖化酶液中吸附6-7h，然后用纱布滤出颗粒，再用pH4.6乙酸-乙酸钠缓冲液冲洗颗粒3~5次，除去表面酶液，吸干表面水分，制得共固定化酶；
所述的载体材料是用海藻酸钠与黄原胶质量比为5:1配制而成。
2.一种用于催陈和澄清山西老陈醋的共固定化酶的使用方法，其特征是将山西老陈醋质量0.8%-1.2%的共固化酶放入陈醋中，在40-45℃条件下用超声波振荡24-26h，然后过滤，去除共固定化酶。
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