[发明专利]分离测定卡泊三醇中间体F及其杂质的方法

权利要求书

1.利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇中间体F及其杂质的方法，其特征在于，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇和乙酸乙酯的混合溶液为流动相进行洗脱，进入检测器进行检测，F结构式如下所示：

所述杂质包括VD2、E、D和F的异构体F’，如以下结构式所示：

所述流动相中甲醇和乙酸乙酯的体积比为7-9.5：1-2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.0×250mm,5μm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为1.5ml/min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测器为紫外检测器，所述检测器的波长为270nm。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述杂质包括VD2、E、D和F的异构体F’，包括以下步骤：

1)分别取待测样品卡泊三醇中间体F及其杂质VD2、E、D和F的异构体F’的对照品，用稀释剂溶解制成待测样品及所述各杂质的对照溶液，分别取待测样品卡泊三醇中间体F及其各杂质对照溶液进样，进行高效液相色谱分析，确定待测样品卡泊三醇中间体F及其各杂质的保留时间；

2)取供试品加稀释剂制成供试品溶液，再取稀释剂作为空白溶液，分别取供试品溶液及空白溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，按限度法根据供试品溶液与对照品溶液中杂质的峰面积比较杂质VD2、E、D和F的异构体F’的含量。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述稀释剂为甲醇和乙酸乙酯的混合溶液，甲醇与乙酸乙酯的体积比为8：2。