[发明专利]一种嵌合抗原受体脂肪干细胞及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤治疗领域，尤其涉及一种嵌合抗原受体脂肪干细胞及其制备方法。

背景技术

肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病之一。在我国，肿瘤极大地威胁着人民的生命健康，极大地降低了肿瘤患者的生活质量，同时肿瘤也给家庭和社会造成了巨大的负担。因此，寻找有效的肿瘤治疗方法，彻底攻克肿瘤是世界医学界的重要研究课题。

肿瘤免疫疗法是当前肿瘤治疗领域最具前景研究方向之一，是近年来一种新兴的、具有显著疗效的肿瘤治疗新型方法。初步的临床试验结果表明其治疗效率非常高，各大药企纷纷寻求与其他公司合作研发肿瘤免疫相关治疗方法。而传统的三大主要治疗手段即手术治疗、化疗、放疗虽然是全球肿瘤治疗的基本手段方法，然而其治疗效果有限。手术治疗虽然可以切除较大体积的肿瘤，然而对于体积较小以及肿瘤转移之后的小型病灶无法达到切除的目的。化疗是利用化学药物杀死肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞的生长繁殖的一种治疗方式，然而，对大多数肿瘤的治疗的有效性较低，特别对中晚期肿瘤患者，治疗效果有限，并且化疗在杀伤肿瘤细胞的同时，也将正常细胞和免疫细胞一同杀灭，导致病患者免疫能力和身体机能下降，生活质量降低。放疗是用放射线照射癌组织，以抑制和杀灭癌细胞的一种治疗方法，然而，放疗对癌细胞和正常细胞没有分辨能力，多次放疗后，患者会产生一系列毒副作用和反应，对治疗肿瘤效果非常有限。因此，随着肿瘤免疫学理论和技术的发展，免疫细胞治疗在肿瘤治疗中的作用日益受到重视。肿瘤生物治疗是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗技术，具有极其光明的应用前景。

目前，免疫肿瘤疗法最热门、最有效果的疗法是基于嵌合抗原受体T细胞(ChimericantigenreceptorTcells,CART)疗法。CART免疫疗法的基本原理是首先分离患者的T细胞，然后利用基因工程改造这种T细胞，即通过逆转录病毒和慢病毒载体给T细胞加入一个能识别肿瘤细胞，并且同时激活T细胞杀死肿瘤细胞的嵌合抗体。然后将这些T细胞进行体外扩增后回输到患者体内，使免疫细胞具有特异性识别和杀伤肿瘤的能力。

嵌合抗原受体（chimericantigenreceptor,CAR）主要由三部分组成，位于细胞外的抗原结合区scFv，跨膜区以及胞内信号转导结构域组成。其中，根据胞内信号转导结构域的研究发展，CAR从第一代发展到目前第三代。第一代CART仅含有一个信号单元，大多来自于CD3ζ。第二代CART是在第一代CART的胞内信号转导结构域基础之上增加了一个共刺激结构域，比如CD28、OX40或者4-1BB。第三代CART是在第二代CART的胞内信号转导结构域基础之上再增加一个共刺激结构域，因此具有两个共刺激结构域，能够进一步提高CART的扩增倍数以及在体内存活的时间，提升肿瘤治疗效果。

尽管目前嵌合抗原受体结合T细胞在治疗一些肿瘤方面取得了非常重大的突破，然而，也存在一些致命缺陷。比如“免疫风暴”反应，这主要是由于T细胞被过度激活，从而引起全身性的激烈的免疫反应，会造成输入CART的患者死亡。另外，逆转录病毒或者慢病毒也不容易感染T细胞，这会造成表达目的嵌合抗原受体的T细胞数量较少，达不到治疗肿瘤的良好效果。并且，T细胞具有个体特异性，每个患者只能够扩增自己的T细胞，而不能够异体移植T细胞，因为会产生免疫排斥，然而肿瘤患者尤其是晚期肿瘤患者免疫系统已经遭到巨大的破坏，分离的T细胞活性不高，不容易在短时间内大规模扩增，因而最终CART的治疗效果大打折扣。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种嵌合抗原受体脂肪干细胞及其制备方法，旨在解决现有嵌合抗原受体T细胞治疗肿瘤容易产生“免疫风暴”、病毒感染效率低以及异体移植产生免疫排斥的问题。

本发明的技术方案如下：

一种嵌合抗原受体脂肪干细胞，其中，所述嵌合抗原受体脂肪干细胞由嵌合抗原受体、脂肪干细胞和肿瘤杀伤因子组成。

所述的嵌合抗原受体脂肪干细胞，其中，所述嵌合抗原受体由scFv抗原结合序列、跨膜序列及胞内信号转导序列组成。

所述的嵌合抗原受体脂肪干细胞，其中，所述scFv抗原结合序列包括轻链可变区序列和重链可变区序列。

所述的嵌合抗原受体脂肪干细胞，其中，所述scFv抗原结合序列包括轻链可变区序列、重链可变区序列、连接轻链可变区序列和重链可变区序列的优化联结区序列及位于轻链可变区序列之前的可溶信号肽序列。