[发明专利]一种水飞蓟素的制备方法

说明书

本发明涉及一种从水飞蓟籽种皮中提取高纯度水飞蓟素的制备方法。该制备方法包括水飞蓟籽脱出种皮，紫外线照射，酶解，无水乙醇提取，挥去提取液中的溶剂后水洗固体得水飞蓟素粗品；无水乙醇溶解，得上样液，通过反相分配色谱，用水‑乙醇水梯度洗脱，收集无水乙醇部分洗脱液，浓缩洗脱液，微波真空干燥，得产品。本发明方法工艺简单、生产效率高、操作简便，产品纯度高达93%以上，且基本无溶剂残留。

技术领域

本发明涉及水飞蓟素的制备方法，更具体地，涉及一种从水飞蓟种子中提取高纯度水飞蓟素的制备方法。

背景技术

水飞蓟素(silmyarin)是一类由二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合而成的黄酮木脂素类成分的混合物，主要来源是菊科植物水飞蓟(silybum marinaum(L)Gaenrt)的种子(又称水飞蓟籽)，主要成分是水飞蓟宾(silybin，silibinin)，异水飞蓟宾(isosilybin，isosilibinin)，水飞蓟亭(siliehristin)，水飞蓟宁(silidinain)四种同分异构体，呈黄色粉末或结晶状粉末。

研究发现，水飞蓟素主要具有保肝利胆的作用，可保护肝脏细胞免受毒性物质侵害，尤其是酒精及环境污染物(农药、重金属等)入侵损害肝脏，临床用于治疗肝炎、胆囊炎等；还具有强力的抗氧化、消除自由基以及抗辐射作用，能保护肝脏细胞免受自由基破坏，促进蛋白质的合成，并且在降血脂、防治动脉粥样硬化、预防脑缺血、抗血小板凝集方面均具有较好效果，被认为是潜在的防治心脑血管疾病的良好药物。因此，提出一种能有效富集水飞蓟素的制备方法是非常有必要的。

我国虽然是水飞蓟种植大国，但目前对水飞蓟素的生产制备的研究仍不够深入，由于水飞蓟素易溶于丙酮、乙酸乙酯、乙醇及甲醇、难溶于氯仿、不溶于水的特性，以及水飞蓟种子自身含有大量油性成分的原因，在制备过程中往往会用到大量有机溶剂，造成产品的溶剂残留现象，或者经碱法处理，影响了水飞蓟素的得率，要经复杂的纯化精制步骤，或者为了追求高纯度而选择了繁杂的提取精制步骤。

例如，现有技术曾提出过一种水飞蓟素的生产方法，采用蒸汽软化水飞蓟壳、乙醇提取、碱水沉淀、分离沉淀干燥即得。虽然该方法工艺简单，但由于碱性试剂会对水飞蓟素有所破坏，因而该方法制得的产品中水飞蓟素含量仅达到70％。现有技术也有提出用生物技术手段来处理水飞蓟籽的方法，将里氏木霉和康宁木霉的复合微生物发酵剂接种在水飞蓟去油种子饼粉中，保温发酵后经热风干燥，无水乙醇提取后加甲醇溶解得不溶物；或者使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶复合酶进行细胞破壁、加以超声波提取，最后以大孔吸附树脂的技术进行纯化,得到了高含量的水飞蓟素。国外专利对水飞蓟原料或采用榨油方式或采用石油醚、正己烷除油，既影响水飞蓟素产品的色泽和收率又容易产生溶剂残留，要使终产品符合溶剂残留小于100ppm的标准需要非常复杂的除杂工艺。

针对现有技术中制备水飞蓟素的方法存在的上述缺陷和不足，本发明的目的即提供 一种工艺简单、生产效率高、操作简便的水飞蓟素制备方法。

发明内容

本发明提供了一种从水飞蓟籽种皮中提取高纯度水飞蓟素的制备方法，包括以下步骤：

⑴取水飞蓟籽，经脱壳机脱出种皮，收集种皮，紫外线照射10-20分钟；

⑵将处理后的水飞蓟籽种皮装入酶解反应罐，加入原料重量0.5-2.0％的纤维素酶：果胶酶：碱性蛋白酶(5:4:1)复合酶，酶解30-50分钟；

⑶将酶处理后的原料装入平转浸出器，用无水乙醇提取，得提取液；

⑷挥去提取液中的溶剂，得固体，用蒸馏水水洗，得水飞蓟素粗品；

⑸用无水乙醇溶解粗品，得上样液，通过反相分配色谱，用水、25％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液、75％乙醇水溶液和无水乙醇作为流动相依次洗脱，收集无水乙醇部分洗脱液；

⑹浓缩收集的洗脱液，微波真空干燥，得产品。