[发明专利]一种牡丹组织培养容器苗技术

权利要求书

1.一种牡丹“风丹(Paenoia ostii)”或“明星(Paenoia suffruticosa Andr.)”组织培养容器苗方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)选择母株外植体进行表面消毒；

b)试管苗(不定芽)增殖培养；

将表面消毒的外植体进行不定芽增殖培养，获得试管苗，其中所述增殖培养的培养基由WPL基本培养基、有机物和植物生长调节剂组成，滴加1M的HCl或NaOH水溶液调节培养基pH值至6.3；

其中：所述WPL基本培养基的组成为：每升培养基含NH₄NO₃ 680-720mg，KH₂PO₄ 136-170mg，KNO₃ 808-948mg，Ca(NO₃)·7H₂O 440-570mg，CaCl₂·2H₂O 404-516mg，MgSO₄·7H₂O 340-406mg，FeSO₄·7H₂O 27.8mg，H₃BO₃ 6.2-8mg，MnSO₄·4H₂O 22.3mg，ZnSO₄·7H₂O 8.6-12mg，CuSO₄·5H₂O 0.025mg，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg，KI 0.83mg，CoCl₂·6H₂O 0.025mg，其余为水；所述有机物的添加量为每升培养基含肌醇80-100mg、烟酸0.5-1mg、盐酸硫胺素0.5-1mg、盐酸吡哆醇0.1-0.5mg、甘氨酸2g、PVP 0.5mg，核黄素20-30mg，AC 100-200mg，蔗糖20-25g，琼脂6-8g；所述植物生长调节剂的用量为每升培养基含吲哚乙酸或吲哚丁酸0.05-3mg/L或萘乙酸0.05-0.1mg/L，细胞分裂素类的6-苄氨基腺嘌呤0-2mg/L；

c)牡丹组织培养小植株容器苗培养、驯化。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于步骤a)中所述外植体表面消毒按照如下方法进行：

a-1)配制消毒液

将20％-30％过氧化氢或次氯酸钙5％－15％或次氯酸钠1％－5％和70％-80％乙醇，按3:1(v:v，体积比)混合，然后每100ml混合液加入吐温20或吐温800.4-1ml；

a-2)外植体经表面清洁，预处理后直接用消毒液处理10-25min、无菌水洗、沥干，建立用于接种在培养基上的无菌培养体系。

3.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤c)中所述牡丹组织培养小植株容器苗培养、驯化过程中生根培养的培养基由混合基质和生根营养液组成，其中所述混合基质由木炭或珍珠岩与泥炭、活性炭组成，其中所述木炭的粒径≤5mm，所述木炭或珍珠岩与泥炭的体积之比为2:1，每升混合基质中含活性炭1g；所述生根营养液为1/3-1/2WPL基本培养基+吲哚丁酸(IBA)1-3mg，其余为水。