[发明专利]一种从肿节风药材中制备异秦皮啶方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种异秦皮啶制备方法，属于药用活性成分提取技术领域。

背景技术

异秦皮啶是天然香豆素类成分，具有较好的体内抗炎、镇痛、抗感染作用（Xiaofeng Niu等，International Immunopharmacology. 2015. 24：432–439; Ling Liu等，Immunobiology, 2015, 220: 406–413；Xiaofeng Niu等，International Immunopharmacology. 2012. 14：164–171），是中药肿节风、刺五加药材特征性成分，并作为药材质量控制指标性成分收载于2015版中国药典（中国药典，2015版，I部，第206、224页），用于肿节风、刺五加药材及其制剂质量控制。目前文献报道异秦皮啶的制备方法有大孔树脂色谱法（何行真，江西中医学院学报，2007，19（4）：45-46）、高速逆流色谱法（江永南等，中药材，2008，31(6)：913-915）。但大孔树脂分离法制备获得的香豆素粗品部位中异秦皮啶含量仅为2.59%，而采用高速逆流仪器贵重成本高、有机溶剂用量大，且制备富集部位仍为粗品，异秦皮啶得率只有3%。其它已申请发明专利的异秦皮啶制备工艺方法包括从刺五加根茎中醇提取、酸水解、1, 1-二氯乙烷萃取获得异秦皮啶，但也仅为粗产品（祖元刚，一种从刺五加根茎中制备异秦皮啶的方法，专利号：201010184243.7）。迄今为止，还没有一种简单可行、制备成本相对低廉的异秦皮啶单体制备工艺公开报道。

发明内容

本发明是克服现有技术不足，提供一种操作简单、成本低廉且所得产品纯度高的异秦皮啶制备方法。

本发明目的的实现方式为：

a. 取肿节风药材饮片，用5-15倍原材料重量水加热取2次，每次30〜120 min，合并提取滤液，过滤，滤液备用；

b.滤液浓缩至适当体积，环己烷-乙酸乙酯（1:1，体积比）等体积萃取1-4次；

c.环己烷-乙酸乙酯萃取相真空减压浓缩，有机溶剂复溶，1-3倍硅胶干法拌样，经5-20倍硅胶柱层析，石油醚：丙酮（15:8，体积比）洗脱，薄层分析，合并含有异秦皮啶流分；

d.甲醇复溶富含异秦皮啶合并流分，经凝胶柱色谱，甲醇洗脱脱色素，再经ODS柱色谱，MeOH-H₂O洗脱，得纯度大于85%粗品异秦皮啶，甲醇-水重结晶，即得纯度大于99%纯品。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明提取用原料药材来源广泛、价格低廉；对肿节风药材饮片采用水加热提取方法，大大减少了全草类药材提取液中色素类杂质；根据异秦皮啶兼有亲水、亲酯性特点，采用环己烷-乙酸乙酯混合有机溶剂萃取，能最大程度减少其它水溶性成分共萃取，降低色素干扰，从而减少后续繁琐的去除无关杂质及色素分离操作；液液萃取用有机溶剂可回收反复利用；本发明操作简单，无需用到贵重仪器设备，从而使样品制备成本大大减低。

附图说明

图1是异秦皮啶UV吸收光谱图。

图2是异秦皮啶电喷雾（ESI）正离子模式高分辨质谱图。

图3是异秦皮啶氢核磁（¹H-NMR，500 MHz, DMSO-_d6）谱图。

图4是异秦皮啶碳核磁（¹H-NMR，125 MHz, DMSO-_d6）谱图。

图5是肿节风水提取液HPLC色谱图。

图6是肿节风水提取液环己烷-乙酸乙酯萃取部分HPLC色谱图。

图7是分离制备异秦皮啶HPLC色谱图。

具体实施方式

实施例

1.异秦皮啶提取分离