[发明专利]HA/RGD修饰的靶向氧化石墨烯双载药复合材料制备方法

说明书

本发明公开了一种HA/RGD修饰的靶向氧化石墨烯双载药复合材料制备方法。包括以下步骤：用ADH对所述氧化石墨烯进行功能化修饰，得到氨基化的氧化石墨烯GO‑ADH；将METH连接桥通过酰胺键共价偶联到HA上，搅拌4‑6h后，透析、冷冻干燥得HA‑METH；加入所得GO‑ADH，得GO‑HA‑METH；加入巯基化的RGD得GO‑HA–RGD复合材料；滴加含美法仑的溶液和含阿霉素的溶液，离心、洗涤，冷冻干燥后获得MEL/DOX‑GO‑HA‑RGD。本发明制备方法操作简单、实验条件温和。整个载体体系载药量高，能够长效缓释，且具有pH敏感性，在较低pH值环境下释放率高，适合肿瘤组织的微环境，具有重要的临床意义。

技术领域

本发明属于材料和生物医药技术领域，具体涉及一种HA/RGD修饰的靶向氧化石墨烯双载药复合材料制备方法。

背景技术

石墨烯是一种具有二维平面结构的碳纳米材料，拥有独特优良的电学，光学和力学性质。近年来，石墨烯衍生物在生物医学领域的研究应用包括生物元件，微生物检测，疾病诊断和药物输运系统等。其氧化物氧化石墨烯比表面积大，平面上含有羧基、羟基、环氧基等丰富的官能，大大提高了其分散性、亲水性、与聚合物的兼容性等。通过π-π共轭、氢键、静电等非共价键或共价键作用能有效地将化学药物、生物分子、靶向基团等固定在氧化石墨烯上，进行功能化修饰。使其在纳米生物医学领域具有很好的应用前景。接下来是氧化石墨烯用于载药体系，肿瘤治疗以及他们的生物安全研究进展。

当前大部分化疗药物存在靶向性差、代谢时间短和易产生耐药性等问题，在杀死肿瘤细胞的同时，也强烈损害了正常细胞和组织功能，导致药效低且毒副作用大，人体免疫力显著下降。抗肿瘤靶向给药系统能够提高水溶性较差药物的溶解性，克服肿瘤细胞的多药耐药性及提高药物的靶向性，达到缓控释目的同时，提高药物在肿瘤部位的富集，增强药物疗效。

利用细胞表面的受体设计靶向给药系统是最常见的主动靶向给药系统，受体介导的靶向给药系统可增强药物的肿瘤高度选择性、减少药物的不良反应。利用配体对药物载体表面进行功能化修饰，通过受体-配体之间特异性的相互作用诱导给药系统内化进入肿瘤细胞，将药物有效的运送至靶组织、靶器官、靶细胞以及细胞内的特定部位，提高治疗效果，降低药物的毒副作用。HA与其受体CD44在恶性肿瘤中有过表达现象，RGD是介导整合素受体与其配体连接的最短识别序列，可以很好地靶向识别肿瘤组织。通过HA/RGD对氧化石墨烯载体进行修饰，可以实现该药物递送系统的肿瘤新生血管的靶向性，达到更有效、精确和安全的治疗目的。

阿霉素DOX是一种广谱抗肿瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用。临床上用于治疗急性淋巴细胞白血病、急性粒细胞性白血病、何杰金和非何杰金淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌等。盐酸阿霉素也有不良反应，主要是消化道毒性、骨髓抑制、心脏毒性、脱发等问题。美法仑MEL是已用于临床的直接作用于DNA的芳香氮芥类抗肿瘤药，主要用于慢性淋巴细胞白血病，也适用于恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、卵巢癌，已经被制成多种剂型应用于癌症病人的临床治疗。但MEL水溶解性低，容易水解，使得它疗效和应用推广受到了很大的限制。

发明内容

本发明目的在于提供一种靶向氧化石墨烯双载药复合材料的制备方法，它具有靶向性好、载药量高、协同治疗效果、药物疗效高、毒副作用小等特点。

为达到上述目的，采用技术方案如下：

HA/RGD修饰的靶向氧化石墨烯双载药复合材料制备方法，包括以下步骤：

1)将氧化石墨烯分散在去离子水中形成分散液；利用活化剂1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)、N-羟基丁二酰亚胺(NHS)介导的羧胺反应，用己二酸二酰肼(ADH)对所述氧化石墨烯进行功能化修饰，得到氨基化的氧化石墨烯GO-ADH；