[发明专利]一种融合蛋白在化妆品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种融合蛋白在化妆品中的应用，属于日化产品领域。

背景技术

干细胞是人体的起源细胞，是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未 分化细胞，是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞，有“万能细胞”之美誉。人类衰老的 根本原因在于干细胞本身的衰老，干细胞生成新细胞的活力会随着年龄的增长而逐渐降 低，因此肌肤就会渐渐失去弹性、老化、暗淡等衰老现象。hSCGF可以快速激活休眠的皮肤干 细胞并促使其生长，让皮肤干细胞达到活化、修复、再生的能力，调节体内微环境，为皮肤干 细胞提供有力的生长环境。但hSCGF作为一种生物活性蛋白，在涂抹情况下很难被皮肤吸 收，限制了其在化妆品领域的应用。

随着现代透皮技术的发展，增强透皮效果成为可能，现常用的促透技术可以分为 两大类，一类为化学促透技术，另一类为物理促透技术。化学促透技术主要是通过在透皮制 剂中加入化学成分，改变皮肤角质层结构，溶解皮脂或打开毛孔、毛囊，促进药物在皮肤中 的扩散与溶解，促进皮肤各部位的血液流畅等手段来提高药物吸收效率。物理促透技术主 要是通过一些物理手段来破坏皮肤表层结构，使一些亲水性的大分子如蛋白药物直接到达 皮肤内部发挥治疗效果，但是其对设备要求高，应用并不广泛。

透皮增强肽是一种能够促进蛋白质透皮的短肽，现已发现的有TD1，其氨基酸序列 为：ACSSSPSKHCG；SPACE,其氨基酸序列为：ACHSALTKHCG；T2，其氨基酸序列为：LVGVFH。但现 有技术中未有透皮增强肽用于化妆品的报道。

发明内容

为克服现有技术的缺点和不足，本发明提供了一种融合蛋白及其在化妆品中的应 用方法，该融合蛋白包括一种透皮肽和人干细胞生长因子hSCGF，透皮肽通过连接肽或共价 连接到hSCGF的N端或C端。本发明发现透皮肽可以促进干细胞生长因子透皮肽穿过完整皮 肤，从而提高干细胞生长因子的肌肤吸收率。

为了实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种融合蛋白，其结构为A-B-X,或A-A-B-X,或A-B-X-B-A；所述A为一种透皮肽，选自 TD1、SPACE或T2；所述B为共价键或长度为2-25个氨基酸的连接肽；X为人干细胞生长因子 hSCGF。

所述A优选为TD1。

所述人干细胞生长因子优选根据人hSCGF全长基因序列（GenBankAccession NO.BC005810.2）克隆得到。

优选的，所述A共价连接到hSCGF的N端。

优选的所述A为TD1，且A共价连接到hSCGF的N端。

优选的，所述融合蛋白通过Ni₂⁺的ChelatingSegparoseFastFlow纯化得到。

更具体的，所述融合蛋白通过如下方法制备得到：从健康的新生儿或小儿包皮环 切术切除的包皮组织中提取总RNA，根据人SCGF全长基因序列（GenBankAccession NO.BC005810.2）设计PCR引物F1，F2；F1：GAGTCCAGCTTAATGC，F2：AAGACACTAACAAGGAGGAG， RT-PCR扩增SCGFcDNA，共价连接将TD1（透皮肽）连接至hSCGF的N端，得到了TD1-hSCGF融合 基因；将其克隆入原核表达质粒pET-22b（+），构建表达载体pET-22b-TD1-hSCGF，将表达质 粒转化E.coliRosetta（DE3），TD1-hSCGF融合蛋白通过Ni₂⁺的ChelatingSegparoseFast Flow纯化，获得纯化的融合蛋白。

上述融合蛋白在化妆品中的应用，其特征是：通过化妆品生产工艺将上述融合蛋 白添加到化妆品中，其中，每100g化妆品的TD1-hSCGF添加量为1μg~30μg，纯度大于90%。

本发明的融合蛋白在化妆品中的应用，其特征是：所述的化妆品包括护肤、健肤、 功效性的美容化妆品。

本发明的融合蛋白在化妆品中的应用，其特征是：所述的化妆品包括护肤、健肤、 功效性的美容产品包括柔肤水、乳液、活性原液、抗衰眼霜、活力面膜、润肤霜、冻干粉。

一种含一种或几种本发明融合蛋白的活性原液，按质量百分比计，包括以下组分：

卡波9400.1-0.5%

尿囊素0.05-1.0%