[发明专利]来源于人尿液细胞的外泌体的获取方法与应用

权利要求书

1.来源于人尿液细胞的外泌体在制备治疗股骨头缺血坏死促进血管新生药物中的应用，

来源于人尿液细胞的外泌体的获取方法为：首先分离培养人尿液来源细胞并收集培养基，将人尿液来源细胞的培养基通过0.22微米滤膜过滤，以去除大的细胞残片以及其它杂质；然后离心除去细胞器，留取上清；再使用可截留100KD分子量的膜，通过离心截留上清中的外泌体，截留完成后，使用PBS对膜进行洗脱即得到外泌体浓缩液。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将外泌体浓缩液转移至蔗糖/重水密度垫上离心分离，收集底部蔗糖/重水密度垫，加入两倍体积PBS，转移至可截留100KD分子的超滤离心管中离心分离；PBS洗涤3次，得到纯化的外泌体悬液。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述人尿液来源细胞包括直接从尿液中分离的细胞；从尿液中分离并在体外培养的细胞。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述外泌体的标志物为CD9、CD11b、CD54、CD63、CD81、CD82以及与人尿液来源细胞特性相应的标志物；

所述与人尿液来源细胞特性相应的标志物包括CD146、CD34、CD24、CD133、SIX2、PAX2、WT1、LHX1或OSR1。