[发明专利]一种印度芥菜的组织培养方法

权利要求书

1.一种印度芥菜的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

a将印度芥菜种子用蒸馏水浸泡5h，然后放入5-10％次氯酸钠溶液消毒 10-20min，将次氯酸钠溶液放入废液罐，用无菌水清洗种子3-5次，然后将种子 和经高压灭菌过的沙子按体积比1:4-5混合，放入4℃冰箱，低温破休眠10-20天；

b然后将破休眠后芥菜种子播入培养基质；

c将印度芥菜地上部分取回组培室，用流水冲洗0.5-1h，去掉地上部分表面的 灰尘、泥沙和微生物；

d将印度芥菜地上部分放入超净工作台，用70-75％酒精消毒40-60s，再用 0.1％-0.15％升汞消毒10-20min，将升汞溶液放到废液缸，然后用无菌水清洗地上 部分8-10次，使残留在植株上的升汞和酒精洗掉；

e用解剖刀取0.5-1cm长茎尖放在培养基上，诱导印度芥菜愈伤的生成；

f将印度芥菜愈伤组织挑出，放入已转入目的基因的农杆菌悬浮液侵染5分 钟；将愈伤组织取出，置于无菌的滤纸上沥干20min；将愈伤组织置于培养基上 继续培养、筛选；

g将印度芥菜愈伤组织转到分化培养基上进行诱芽培养；

h将印度芥菜壮苗转接到生根培养基上进行生根培养；

i将组培瓶瓶盖打开，将试管苗放在室内培养3天，然后将试管苗取出组培瓶， 洗掉根系上培养基，定植到步骤b的基质中，在温室内进行驯化炼苗培养10天， 既得印度芥菜组培苗。

2.根据权利要求1所述的一种印度芥菜的组织培养方法，其特征在于， 步骤b中培养基质由蛭石、珍珠岩、草炭按照1:1:3的重量比混合组成。

3.根据权利要求1所述的一种印度芥菜的组织培养方法，其特征在于， 步骤e中培养基由1/2MS基本培养基+3％蔗糖+0.7％琼脂+0.8-1.2mg/L NAA+0.3-0.5mg/L6-BA组成。

4.根据权利要求1所述的一种印度芥菜的组织培养方法，其特征在于， 步骤g中培养基由MS基本培养基+3％蔗糖+0.7％琼脂+0.1-0.2mg/LNAA+1-2 mg/L6-BA组成。

5.根据权利要求1所述的一种印度芥菜的组织培养方法，其特征在于， 步骤h中培养基由MS基本培养基+3％蔗糖+0.7％琼脂+3.5-4mg/LNAA组成。