[发明专利]一种植物诱导型启动子及其应用

权利要求书

1.一种启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

2.与权利要求1所述启动子有关的生物材料，为下述A1）-A4）中的任意一种：

A1）含有权利要求1所述启动子的表达盒；

A2）含有权利要求1所述启动子或A1）所述表达盒的重组载体；

A3）含有权利要求1所述启动子、A1）所述表达盒或A2）所述重组载体的重组微生物；

A4）含有权利要求1所述启动子、A1）所述表达盒或A2）所述重组载体的重组细胞系。

3.权利要求1所述启动子在作为植物诱导型启动子中的应用；所述诱导型启动子为逆境诱导型和/或ABA诱导型启动子；所述逆境胁迫为盐胁迫和/或干旱胁迫；所述植物为野大麦或拟南芥。

4.权利要求1所述启动子或权利要求2的A1）-A3）中任一所述生物材料在植物体内启动目的基因表达的应用及在培育植物品种中的应用，所述植物为野大麦或拟南芥。

5.一种权利要求1中SEQ ID NO. 1所示的启动子的获得方法，其特征在于，包括如下步骤：1）采用CTAB 法提取野大麦基因组 DNA，2）采用基因组步移法克隆野大麦HbCIPK2启动子区域；步骤2)中进行两轮PCR扩增，分别使用 2条反向引物 SP1和SP2，所述 SP1和SP2引物分别为序列表中SEQ ID NO. 2、SEQ ID NO. 3所示的DNA分子。

6.一种培育转基因植物的方法，是将权利要求1所述启动子和目的基因导入植物中，得到所述目的基因受逆境胁迫诱导和/或ABA诱导表达的植物，所述植物为野大麦或拟南芥。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）构建以权利要求1所述启动子驱动GUS基因的表达载体proHbCIPK2:GUS；2）利用表达载体proHbCIPK2:GUS获得转基因株系；

所述步骤1）的具体操作方法为：使用引物proHbCIPK2-F、 proHbCIPK2-R采用PCR方法扩增权利要求1所述启动子并引入酶切位点PstI和XhoI，测序后插入载体pYBA1121，构建获得表达载体proHbCIPK2:GUS；所述引物proHbCIPK2-F、 proHbCIPK2-R分别为序列表中SEQID NO. 4、SEQ ID NO. 5所示DNA分子。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述步骤2）的具体操作方法为：将载体proHbCIPK2:GUS电击转化到农杆菌菌株，制备转化菌液，对植株进行浸染转化，收获的T0代种子在平板上筛选转化子。