[发明专利]生物流体的顺序处理

说明书

用于通过在中空圆柱形离心处理室(300)中的处理步骤来顺序处理不透明和透明生物流体如全血、单采血液、骨髓血液、脐带血、血沉棕黄层或培养的细胞的方法，中空圆柱形离心处理室为一次性套件的一部分。根据处理室中的给定处理配置，选自洗涤、孵育、转导、分离、密度梯度分离、稀释和体积调整中的至少三种不同程序分别进行一次或重复多次。每种程序涉及通过活塞(310)的位移进入处理室的输入、处理室中的操作和来自处理室的输出。至少三种不同程序依次顺序链式进行，以构成处理室及其一次性套件中的整个顺序操作。第一个应用是孵育，其用于将人血细胞或干细胞与磁珠结合。第二个应用是转导，病毒通过转导将外来遗传物质插入人血细胞或干细胞。第三个应用是修复生物流体以实现可重现的血细胞或干细胞的浓度和体积。

发明领域

本发明涉及用于通过包括洗涤、孵育、转导、分离、密度梯度分离、稀释和体积调整的方法步骤处理生物流体如全血、单采血液、骨髓血液、脐带血、血沉棕黄层或培养的细胞的系统。

发明背景

EP-B-0 912 250(C.FELL)(其内容通过引用并入本文)描述了用于将生物流体处理和分离成组分的系统，其包括用于接收待分离的生物流体和分离的组分的一组容器，以及可选的一个或多个另外的用于添加剂溶液的容器。中空离心机处理室可通过处理室与旋转驱动单元的接合而围绕旋转轴旋转。处理室具有用于待处理的生物流体和用于处理的生物流体组分的轴向入口/出口。该入口/出口进入可变体积的分离空间，其中进行生物流体的整个离心处理。处理室包括从处理室的端壁延伸的大致圆柱形壁，该大致圆柱形壁在其中限定中空处理室，其占据与旋转轴同轴的中空开放圆柱形空间，轴向入口/出口设置在所述端壁与大致圆柱形壁同轴，以进入中空处理室。处理室在大致圆柱形壁内包含可轴向移动的构件，例如活塞。可变体积的分离空间由处理室的上部通过大致圆柱形壁和容纳在处理室的大致圆柱形壁中的可轴向移动的构件限定，其中可移动构件的轴向移动改变分离空间的体积，可移动构件在处理室内可轴向移动，以在离心处理之前或期间通过入口使选定量的待处理的生物流体进入分离空间，并且在离心处理期间或之后通过出口从分离空间排出处理的生物流体组分。提供了用于监视可移动构件的位置从而控制进入的生物流体的量和分离的组分的排出的手段。该系统还包括分配阀配置，用于建立处理室与所选定的容器之间的选择性连通，或用于将处理室和容器不连通。

根据EP-B-1 144 026，此类系统布置成以分离和非分离运输模式操作，这提供了使用包括先前未设想的新应用的系统的更大可能性，例如造血干细胞的分离和通常的实验室处理。

根据EP-B-0 912 250和EP-B-1 144 026的系统设计用于使用作为构成封闭的无菌环境的一次性套件的一部分的处理或混合室来操作分离生物流体，并且已经被证明对于许多分离应用、特别是对于来自供体或患者的组分的在线分离是多价的。该系统已由Biosafe SA以商标Sepax商业化。

以前使用Sepax系统主要用于处理血液和血液衍生物产品，其含有成体干细胞，例如来自如骨髓、脐带血或患者动员后的外周血的血液来源的血沉棕黄层中悬浮的造血干细胞、间充质干细胞或脂肪来源的干细胞。

迄今为止最典型的应用是血液或血液衍生物的体积减少处理。通过这样做，血浆和大多数红细胞被耗尽，并且基本上包含悬浮在剩余血浆中的白细胞和干细胞以及红细胞的血沉棕黄层被收集在可选择的体积中。根据所选择的最终体积，可以根据用户的需要添加更多的血浆和红细胞。

经常使用Sepax技术的第二个应用是洗涤应用。如果在48小时内没有使用，干细胞浓缩产品通常是冷冻保存的。一旦含有干细胞的细胞产品需要移植，就进行解冻程序，然后推荐使用洗涤程序来消除由残留的有毒二甲基亚砜(DMSO)产生的移植过程中的副作用。

第三个应用由将密度梯度介质与想要减小体积的所需产品混合组成。在沉淀过程中，梯度密度介质将在离心过程中在血浆和单核细胞和淋巴细胞群体之后但在粒细胞和红细胞之前产生一层。Sepax技术能够提取悬浮在不含红细胞的介质中的白细胞和干细胞。当供体和受体之间存在轻微或重大不相容时，这尤其适用于移植。