[发明专利]疏水性半抗原分析物的精确测定测量

说明书

公开了用于测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质。对未知样品进行第一测定方法以获得未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度。对未知样品进行第二测定方法以获得未知样品中的干扰物质的浓度。应用利用步骤(a)中获得的疏水性半抗原分析物的测量浓度和干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度。

本申请根据35 USC § 119(e)主张2014年12月17日提交的美国临时申请号62/093,105的权益。上面引用的专利申请的全部内容在此通过引用明确并入本文。

背景

本发明涉及用于测定怀疑含有分析物的样品中分析物的浓度的方法。更具体地，本发明涉及减少干扰物质对上述测定样品中分析物的浓度的方法期间进行的测量的影响。

疏水性化合物诸如，例如药物，维生素诸如例如维生素D和维生素B12，以及半抗原激素，通常存在于脂蛋白(其替代分析物标记物是胆固醇)的疏水核心中，胆固醇存在于所有脂蛋白，包括低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白(IDL)、高密度脂蛋白(HDL)和乳糜微粒。

如上所述，维生素D是一种此疏水性化合物。通过UV光形成维生素D后，其通过血液中的脂蛋白和维生素D结合蛋白(VDBP)转运。在不使用有机溶剂诸如例如醇提取维生素D的维生素D的测定中，使用合适的释放剂从VDBP释放维生素D。然而，脂蛋白核心中的维生素D分子留在脂蛋白的核心中，并且对于大部分未被触及。提取测定法是费力的，并且如上所提及，涉及对样品使用有机溶剂。因此，维生素D或其他疏水性化合物的大多数免疫测定法受样品中的一种或多种干扰物质(诸如例如胆固醇和脂蛋白)负面影响，因为未从干扰物质(诸如例如脂蛋白的核心)释放的维生素D分子不是免疫测定法中使用的抗体可及的。样品中维生素D的实际量可能无法准确测定，并且在免疫测定法中观察到的维生素D的量可能被错误地升高或抑制。

评价生物样品中的维生素D水平是重要的，因为维生素D缺乏与哺乳动物中的许多疾病相关。持续需要开发快速和准确的诊断方法来测量取自患者的样品中疏水性半抗原分析物的水平。所述方法应当是完全可自动化的，并且是准确的，甚至当对具有各种干扰物质的样品进行时也是如此。测定方法应当提供样品中疏水性半抗原分析物的量的精确测量，同时尽可能降低由样品中存在的干扰物质导致的不准确性。

概述

根据本文所述的原理的一些实例涉及测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质。对未知样品进行第一测定方法以获得未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度。对未知样品进行第二测定方法以获得未知样品中的干扰物质的浓度。应用利用步骤(a)中获得的疏水性半抗原分析物的测量浓度和干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度。校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用第一测定方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，且使用参考方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，其中所述至少两种不同样品还包含干扰物质，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是每种不同样品的通过参考方法和第一测定方法测定的疏水性半抗原分析物的浓度之间的差异，(iii)测量所述至少两种不同样品各自的干扰物质的浓度，且(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自中的偏差和干扰物质的浓度进行回归分析来确定校正公式。