[发明专利]miR-29模拟物及其用途

说明书

本发明涉及miRNA的合成寡核苷酸模拟物。特别地，本发明提供了miR‑29的双链、化学修饰的寡核苷酸模拟物。还描述了包含所述模拟物的药物组合物及其在治疗或预防与细胞外基质基因调节异常相关的状况，如组织纤维化状况。

相关申请的交叉引用

本申请要求2014年9月8日提交的，美国临时申请号62/047,562的优先权，其全部内容通过引用在此并入本申请。

发明领域

本发明涉及在体内增加miRNA活性的合成的miRNA模拟物或前miR。特别地，本发明涉及miR-29的模拟物及其在减少胶原沉积和相关状况(如纤维化)中的用途。

发明背景

基于在使用微RNA(miRNA)的遗传或药理调节的动物疾病模型中收集的功能获得或功能丧失的数据，miRNA是疾病过程中的重要参与者现已被广泛接受。这些研究结合阳性的临床疗效数据(Janssen等，2013)强调了miRNA的相关性以及miRNA成为下一类治疗的可行性。事实上，miRNA作为治疗干预点具有若干优点，因为其很小并包括已知序列。此外，由于单个miRNA能够调节生物学途径中的很多靶mRNA，因而原则上调节miRNA可以影响整个基因网络并且改善复杂的疾病表型(van RooijOlson,2012)。

尽管很多研究已显示出使用称为抗miR的单链miRNA抑制剂的治疗作用，但是恢复或增加miRNA功能的努力一直滞后(van Rooij et al,2012)。目前，可以通过病毒过表达或通过使用合成的双链miRNA增加miRNA的功能。到目前为止，腺相关病毒(AAV)驱动给定miRNA的表达以恢复其在体内活性的用途在肝细胞癌和肺癌(KasinskiSlack,2012；Kota等，2009)以及脊髓和延髓肌肉萎缩(Miyazaki等，2012)小鼠模型中显示出是有效的，但是一直未对使用基于未制剂的合成寡核苷酸的方法以增加miRNA的水平进行很好的探索。

已对微RNA-29(miR-29)家族调节细胞外基质蛋白的能力进行了很好的表征(He等，2013)。该家族由miR-29a、-29b和-29c组成，其以两个双顺反子簇的形式表达(miR-29a/-29b-1和miR-29b-2/-29c)，并且在序列上具有较高同源性，不同成员之间仅在成熟miRNA的3’区内存在少量错配(van Rooij等，2008)。在不同类型的组织纤维化中所有三个成员均是减少的，并且针对心脏(van Rooij等，2008)、肾脏(Qin等，2011；Wang等，2012；Xiao等，2012)、肝脏(Roderburg等，2011；Sekiya等，2011；Zhang等，2012)、肺(Cushing等，2011；Xiao等，2012)和系统性硬化症(Maurer等，2010)均已显示出增加miR-29水平的治疗益处。

在本领域中存在对能够在体内有效增加miR-29活性的miR-29合成寡核苷酸模拟物的需求。此类miR-29模拟物或miR-29promiR对于治疗多种组织纤维化状况是有用的。

发明概述

本发明部分地基于可以将具有针对稳定性和细胞摄取的修饰的miRNA模拟物用于复制miR-29的内源性功能的发现。例如，在肺纤维化的情况下，使用miR-29b模拟物的治疗性治疗使博来霉素诱导的miR-29减少恢复并且阻止和逆转肺纤维化，这与在疾病过程中被诱导的miR-29靶基因的抑制相吻合。类似地，使用miR-29b模拟物治疗皮肤切口下调细胞外基质基因和参与纤维化过程的其他基因的表达。因此，本发明提供了双链RNA miR-29模拟化合物。