[发明专利]无热量甜味剂及合成方法有效
| 申请号： | 201580051860.0 | 申请日： | 2015-10-02 |
| 公开（公告）号： | CN106714578B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 毛国红;X·于 | 申请（专利权）人： | 康纳根有限公司 |
| 主分类号： | A23L27/30 | 分类号： | A23L27/30;C12P19/56;C07H15/24 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 黄登高 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 热量 甜味剂 合成 方法 | ||
1. 一种由甜茶苷合成甜菊苷和莱鲍迪苷KA的混合物的方法，所述方法包括：
制备反应混合物，所述反应混合物包含甜茶苷，选自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物，选自具有SEQ ID NO: 3的序列的EUGT11和具有SEQ IDNO: 11的序列的UDP-糖基转移酶融合酶的UDP-糖基转移酶；以及
温育所述反应混合物足够时间以生成甜菊苷和莱鲍迪苷KA的混合物，其中葡萄糖共价偶联至甜茶苷的C2’-19-O-葡萄糖以生成莱鲍迪苷KA，并且葡萄糖共价偶联至甜茶苷的C2’-13-O-葡萄糖以生成甜菊苷。
2.根据权利要求1所述的方法，其还包括向所述反应混合物中添加蔗糖合成酶。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述蔗糖合成酶选自拟南芥蔗糖合成酶1；拟南芥蔗糖合成酶3；和绿豆蔗糖合成酶。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述蔗糖合成酶为阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述UDP-糖基转移酶为UDP-糖基转移酶融合酶。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述UDP-糖基转移酶融合酶包含阿拉伯芥蔗糖合成酶1结构域。
7. 一种由甜茶苷合成莱鲍迪苷KA的方法，所述方法包括：
制备反应混合物，所述反应混合物包含甜茶苷，选自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物；及具有SEQ ID NO: 5的序列的HV1；以及
温育所述反应混合物足够时间以生成莱鲍迪苷KA，其中葡萄糖共价偶联至甜茶苷的C2’-19-O-葡萄糖以生成莱鲍迪苷KA。
8.根据权利要求7所述的方法，其还包括向所述反应混合物中添加蔗糖合成酶。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述蔗糖合成酶选自拟南芥蔗糖合成酶1；拟南芥蔗糖合成酶3；和绿豆蔗糖合成酶。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述蔗糖合成酶为阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
11. 一种由甜茶苷合成莱鲍迪苷G的方法，所述方法包括：
制备反应混合物，所述反应混合物包含甜茶苷，选自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物，选自具有SEQ ID NO: 1的序列的UGT76G1和具有SEQ IDNO: 9的序列的UDP-糖基转移酶融合酶的UDP-糖基转移酶；以及
温育所述反应混合物足够时间以生成莱鲍迪苷G，其中葡萄糖共价偶联至甜茶苷的C3’-13-O-葡萄糖以生成莱鲍迪苷G。
12.根据权利要求11所述的方法，其还包括向所述反应混合物中添加蔗糖合成酶。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述蔗糖合成酶选自拟南芥蔗糖合成酶1；拟南芥蔗糖合成酶3；和绿豆蔗糖合成酶。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述蔗糖合成酶为阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
15.根据权利要求11所述的方法，其中所述反应混合物包含UDP-糖基转移酶融合酶。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述UDP-糖基转移酶融合酶包含阿拉伯芥蔗糖合成酶1结构域。
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