[发明专利]人白细胞介素‑2的免疫刺激单克隆抗体

说明书

发明领域

本发明涉及结合人白细胞介素-2(hIL-2)的抗体。本发明更具体地涉及特异性地结合hIL-2的特定表位并且当与该表位结合时能够抑制hIL-2与CD25结合的抗体。此外，本发明涉及所述抗体的体外和体内治疗应用。

发明背景

恶性黑素瘤是男性和女性中的常见癌症类型。一旦黑素瘤成为转移性的并扩散至远处，5年的存活率非常差，计算在约15％。转移性黑素瘤的当前可用治疗策略几乎不改善该存活率。

白细胞介素-2(IL-2)是能够有效地刺激细胞毒性淋巴细胞抵抗转移性肿瘤的细胞因子。然而，IL-2也能够刺激所谓的CD25⁺CD4⁺调节T细胞(Treg细胞)，所述CD25⁺CD4⁺调节T细胞(Treg细胞)对自身免疫性疾病的预防是关键的。重要地是，Treg细胞能显著地抑制细胞毒性淋巴细胞的抗肿瘤应答，因此，其有点拮抗IL-2的有益抗肿瘤效果。而且，在实现临床抗肿瘤应答所需的剂量下，IL-2可能发挥毒性副作用。

自20世纪80年代初以来，使用标准的IL-2免疫疗法用于转移性黑素瘤和转移性肾细胞癌的免疫治疗，其分别导致FDA在1996和1992对这些适应症的批准。虽然在高剂量下给予的IL-2在约17％的患者中显示客观应答率以及在约6-9％的患者中显示完全消退，所述患者患有这些致命的转移性癌症，但是在这些剂量下给予的IL-2时常导致毒性副作用，如低血压、肺水、肝细胞损伤、胃肠道毒性和全身水肿。而且，如上所述，IL-2能够刺激Treg细胞，所述Treg细胞继而能够抑制抗肿瘤CD8⁺T细胞和NK细胞的活性。

已显示IL-2与特定的抗IL-2单克隆抗体(mAb)的组合通过

(1)使IL-2优选导向细胞毒性淋巴细胞，而不是Treg细胞，并且

(2)致使IL-2更有效但毒性小(Boyman O,Kovar M,Rubinstein MP,Surh CD,and Sprent J.Selective stimulation of T cell subsets with antibody-cytokine immune complexes.Science(2006)311:1924-1927；Krieg C,Letourneau S,Pantaleo G,and Boyman O.Improved IL-2immunotherapy by selective stimulation of IL-2 receptors on lymphocytes and endothelial cells.Proceedings of the National Academy of Sciences USA(2010)107:11906-11911)在癌症免疫疗法的实验鼠模型中改善IL-2疗法。

该方法具有以下优点：未突变的天然IL-2经抗IL-2 mAb被递送至CD8⁺T细胞和NK细胞，其随后发挥有效的抗肿瘤特性，同时与该类抗IL-2 mAb复合的IL-2几乎不激活Treg细胞。而且，在小鼠中，与该类抗IL-2 mAb复合的IL-2比标准的IL-2免疫疗法的毒性更小。然而，由于缺乏合适的抗人IL-2 mAb，该疗法迄今为止尚未用于患者中。

发明概述

通过本发明所解决的问题是提供能够识别并结合人IL-2的特异性表位的抗人IL-2单克隆抗体，从而相比于Treg细胞有利于刺激细胞毒性T细胞和NK细胞，用于在体外和体内的治疗应用中使用。该问题通过独立权利要求的主题解决。

根据本发明的第一方面，提供人白细胞介素-2(hIL-2)的特异性单克隆抗体(mAb)或者其抗原结合片段，其中所述抗体能够结合hIL-2中的特定表位，从而抑制与CD25的结合，因此调节hIL-2/IL-2R的相互作用的免疫学效果。本发明的抗体还通过以下参数中的至少一项来表征：

a)mAb的可变链包含具有与SEQ ID NO 005或SEQ ID NO 006相比≥85％、≥90％、≥95％或者≥99％同一性的氨基酸序列；

b)所述抗体与hIL-2的结合为即反应其中mAb*hIL-2代表抗体和白细胞介素的结合复合物，其特征在于解离常数(K_D)≤7,5nmol/L、≤5nmol/L、≤3nmol/L、≤2nmol/L或≤1,5nmol/L；