[发明专利]用于生物合成化合物的方法，试剂和细胞

权利要求书

1.在重组宿主中产生末端羟基(C_3-8羟基烷基)-C(＝O)OCH₃酯的方法，所述方法包括：

a)将C_4-9羧酸酶促转化成(C_3-8烷基)-C(＝O)OCH₃酯；并且

b)将(C_3-8烷基)-C(＝O)OCH₃酯酶促转化成末端羟基(C_3-8羟基烷基)-C(＝O)OCH₃酯。

2.权利要求1的方法，其中使用具有脂肪酸O-甲基转移酶活性的多肽将C_4-9羧酸酶促转化成(C_3-8烷基)-C(＝O)OCH₃酯。

3.权利要求2的方法，其中所述具有脂肪酸O-甲基转移酶活性的多肽与SEQ ID NO:22，SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列具有至少70％的序列同一性。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中使用具有单加氧酶活性的多肽将(C_3-8烷基)-C(＝O)OCH₃酯酶促转化成末端羟基(C_3-8羟基烷基)-C(＝O)OCH₃酯。

5.权利要求4的方法，其中所述具有单加氧酶活性的多肽归类在EC1.14.14.-或EC 1.14.15.-下。

6.权利要求4的方法，其中所述具有单加氧酶活性的多肽与SEQ ID NO:13-15，SEQ ID NO:27和/或SEQ ID NO:28所示的氨基酸序列具有至少70％序列同一性。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中从C_4-9烷酰基(alkanoyl)-CoA酶促产生所述C_4-9羧酸。

8.权利要求7的方法，其中具有硫酯酶活性的多肽从C_4-9烷酰基-CoA酶促产生所述C_4-9羧酸。

9.权利要求8的方法，其中所述具有硫酯酶活性的多肽与SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:32或SEQ ID NO:33所示的氨基酸序列具有至少70％的序列同一性。

10.权利要求7的方法，其中具有丁醛脱氢酶活性的多肽和具有醛脱氢酶活性的多肽从C_4-9烷酰基-CoA酶促产生所述C_4-9羧酸。

11.权利要求1-10中任一项的方法，所述方法还包括将末端羟基(C_3-8羟基烷基)-C(＝O)OCH₃酯酶促转化成末端羟基C_4-9羟基链烷酸(hydroxyalkanoate)。

12.权利要求11的方法，其中具有脱甲基酶活性的多肽或具有酯酶活性的多肽将末端羟基(C_3-8羟基烷基)-C(＝O)OCH₃酯酶促转化成末端羟基C_4-9羟基链烷酸。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中C_4-9羧酸是己酸，并且酶促转化成己酸甲酯；并且

将所述己酸甲酯酶促转化为6-羟基己酸甲酯。

14.权利要求7-13中任一项的方法，其中所述C_4-9烷酰基-CoA是己酰基-CoA，并且从己酰基-CoA酶促产生己酸。