[发明专利]涉及经工程改造的CD16的多肽、细胞和方法

权利要求书

1.一种包含编码功能CD16多肽变体的多核苷酸的细胞，所述功能CD16多肽变体具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的197位的丝氨酸残基置换为脯氨酸的氨基酸序列。

2.权利要求1的细胞，其中197位的丝氨酸残基的置换导致阻断CD16切割的构象改变。

3.权利要求1的细胞，其中所述功能CD16多肽变体进一步包含在176位的缬氨酸（176V）。

4.权利要求1的细胞，其中所述细胞为：

(i) 自然杀伤(NK)细胞；

(ii) 中性粒细胞；

(iii) 单核细胞；或

(iv) 多能干细胞或从所述多能干细胞生成的分化细胞。

5.权利要求4的细胞，其中：

(i) 所述多能干细胞是诱导多能干细胞(iSPC)或胚胎干细胞(ESC)；或

(ii) 从所述多能干细胞生成的分化细胞是造血细胞。

6.权利要求1的细胞，其中所述功能CD16变体显示出：

(i) 减小的对胞外域脱落的敏感性；

(ii) 与没有相同修饰的CD16多肽相比，减小的对ADAM17介导的脱落的敏感性；

(iii) 减小的对NK细胞刺激时的切割的敏感性；或

(iv) 与没有相同修饰的CD16多肽相比，增加的CD16-介导的活性。

7.权利要求4的细胞，其中与表达野生型CD16多肽的NK细胞相比，包含功能CD16多肽变体的NK细胞显示出至少一种以下特性：

(a) 增加的抗肿瘤能力；

(b) 增加的抗病毒能力；

(c) 改善的抗体依赖性细胞细胞毒性；

(d) 增加的IFNγ或TNFα产生；

(e) 增加的CD16介导的活性；

(f) CD16更高的表面水平；

(g) 可溶性CD16的更低水平；

(h) 增强的细胞刺激；和

(i) 增加的体内抗癌活性。

8.权利要求1的细胞，其中所述细胞进一步包含双特异性杀伤衔接体(BiKE)或三特异性杀伤细胞衔接体(TriKE)。

9.权利要求8的细胞，其中所述BiKE包括CD16×CD33 BiKE、CD16×CD19 BiKE或CD16×EP-CAM BiKE。

10.包含权利要求1的细胞的细胞群在制备用于一种方法的药物中的用途，其中所述方法包括：

给予需要这种治疗的患者包括以下的疗法：

给予所述患者包含权利要求1的细胞的细胞群。

11.权利要求10的用途，其中所述方法进一步包括给予所述患者治疗性NK效应物。

12.权利要求11的用途，其中所述治疗性NK效应物包含治疗剂。

13.权利要求12的用途，其中所述治疗剂：(i)特异性识别肿瘤抗原；或(ii)包括特异性识别所述肿瘤抗原的抗体或抗体片段；或(iii)特异性识别病毒靶。

14.权利要求13的用途，其中：(i)所述肿瘤抗原包括HER2；或(ii)所述抗体包括曲妥单抗（trastuzumab）或利妥昔单抗(rituximab)。

15.权利要求11的用途，其中所述治疗性NK效应物包括双特异性杀伤衔接体(BiKE)。

16.权利要求15的用途，其中所述BiKE包括CD16×CD33 BiKE、CD16×CD19 BiKE或CD16×EP-CAM BiKE。