[发明专利]针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法

权利要求书

1.针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：该方法通过高效凝胶液相色谱法进行检测，针对乳粉特性设定所使用的处理试剂及试剂用量及处理参数，实现乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测。

2.根据权利要求１所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

A、α-乳白蛋白的提取：在下述三种方式中任选其一进行乳粉中α-乳白蛋白的提取：采用盐酸调节pH值提取、盐酸胍溶液和巯基乙醇提取、醋酸盐缓冲溶液提取；

B、高效凝胶液相色谱法检测：高效凝胶液相色谱的流动相采用下述两种溶液的任一种：pH=4.5-7.5的4-8mol/L的盐酸胍溶液、乙腈/水/三氟乙酸按体积比40-50/50-60/0.1配制的溶液；以流速0.4-0.8mL/min洗脱样品，柱温25-40℃；检测波长为210-280nm。

3.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤A中，在下述三种方式中任选其一进行乳粉中α-乳白蛋白的提取：采用盐酸调节pH=4.6提取、盐酸胍溶液和巯基乙醇提取、pH=4.6的醋酸盐缓冲溶液提取。

4.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤A中，α-乳白蛋白的提取采用盐酸胍溶液溶解样品再加入巯基乙醇进行处理，其中盐酸胍溶液浓度为5-7moL/L，巯基乙醇的量为每1.5mL盐酸胍溶液添加5-20μL。

5.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中所述的高效凝胶液相色谱柱采用TSK-GelG2000SWXL5μm、TSK-GelG3000SWXL5μm、TSK-GelG2000SW10μm凝胶柱中的任一种。

6.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中所述的流动相采用pH为5.5-7.5的5-7.5mol/L的盐酸胍溶液，以流速0.4-0.7mL/min洗脱样品，柱温25-35℃。

7.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中所述的流动相采用pH为6.0-7.5的6-7mol/L的盐酸胍溶液，以流速0.4-0.6mL/min洗脱样品，柱温25-30℃。

8.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中所述的检测波长为270-280nm。

9.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中，样品的进样量为30-65μL。

10.根据权利要求2所述的针对乳粉中α-乳白蛋白的高效分离和精确定量检测方法，其特征在于：步骤B中，样品的进样量为40-55μL。