[发明专利]基于IL-12稳定膜表达的肿瘤治疗剂及其制法和用途

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括融合在一起的以下元件：

(i)无、或位于N端的信号肽和/或前导肽；

(ii)第一蛋白元件；

(iii)第二蛋白元件；以及

(iv)无、或位于第一蛋白元件和第二蛋白元件之间的连接肽元件；

其中，所述信号肽可操作地连于由(ii)、(iii)和(iv)所构成的融合元件；

并且第一蛋白元件为IL-12蛋白元件；第二蛋白元件为突变型CD62L的蛋白元件，所述突变型CD62L的蛋白元件缺失了ADAM17的切割位点；

并且所述的融合蛋白具有选自下组的结构：

(1)式Ia所述结构：

D-A-B (Ia)，或

(2)式Ⅱa所述结构：

D-A-C-B (Ⅱa)，

其中，

A为IL-12蛋白元件；

B为突变型CD62L蛋白元件；

C为无、或连接肽元件；

D为无、信号肽和/或前导肽序列；

各“-”独立地表示连接上述元件的肽键或肽接头；其中所述的突变型CD62L的蛋白元件缺失了KLDKSFS序列中的部分序列或全部序列，从而导致无法被ADAM17切割；

其中，所述的IL12蛋白元件的序列如SEQ ID NO.:4所示；并且所述的突变型CD62L蛋白元件的序列如SEQ ID NO.:6所示。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的连接肽元件的序列如SEQ IDNO.:7或8所示。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.:2所示。

4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码权利要求1所述的融合蛋白。

5.一种载体，其特征在于，它含有权利要求4所述的多核苷酸。

6.一种宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求5所述的载体或基因组中整合有权利要求4所述的多核苷酸。

7.一种产生权利要求1所述的蛋白的方法，它包括步骤：

(1)在适合表达的条件下，培养权利要求6所述的宿主细胞，从而表达出权利要求1所述的融合蛋白；和

(2)无或分离所述融合蛋白。

8.一种免疫细胞，其特征在于，所述的免疫细胞在膜表面上携带权利要求1所述的融合蛋白。

9.一种药物组合物，其特征在于，所述的组合物包含：

权利要求8所述的免疫细胞，以及

药学上可接受的载体。

10.一种如权利要求1所述的融合蛋白和/或权利要求8所述的免疫细胞的用途，其特征在于，用于制备治疗肿瘤的药物。

11.一种非治疗性的体外杀灭肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括步骤：将权利要求8所述的免疫细胞与肿瘤细胞进行接触，从而杀灭所述肿瘤细胞。