[发明专利]一种研究小麦高温胁迫的试验方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物幼苗高温胁迫试验技术领域，具体地说是一种研究小麦 高温胁迫的试验方法。

背景技术

在目前的小麦幼苗高温胁迫试验中，幼苗生长的一致性关系试验的成败， 受到现有幼苗培育手段的限制，固体培养基培育幼苗时，仅能够在选种过程 中进行把关，即选用大小、色泽、饱满度完全一致的种子，希望以此培育出 的差异较小的小麦幼苗材料，尽量保证试验材料选取的统一性和准确性。而 使用固体培养基培育幼苗时，往往会出现缺苗以及畸形苗偏多的现象，无法 保证用于试验处理的试验材料的统一性，给后续高温胁迫的试验操作带来困 难与不便。

发明内容

本发明提供了一种研究小麦高温胁迫的试验方法，其通过对小麦幼苗采 取液体培养的方法，在育苗过程中进行多次筛选，能避免出现缺苗及畸形苗 偏多的现象，保证移苗时试验材料的均一性，使之符合高温胁迫试验的控制 单一变量原则。

本发明解决其技术问题所采取的技术方案是：

一种研究小麦高温胁迫的试验方法，包括的操作步骤有：幼苗培养、品 种选择、硫氢化钠溶液配制、硫氢化钠溶液喷施、硫氢化钠溶液浓度优化、 硫氢化钠溶液喷施时间及次数优化；其中，

幼苗培养的方法为：

(1)选种：去除破损、霉烂、干瘪的种粒，数取一定数目的小麦种子。

(2)清水浸种：将数取的小麦种子置于容器中，且保证小麦种占容器容 积不超过1/2，加水浸没种子3至5厘米，然后在负压条件下使种子在水中相 对晃动，直至种子的表面完全浸水不再存有气泡，最后用清水清洗小麦种子2 至5次。

负压条件下能促进种子表面与水充分接触。经该负压处理，能够较快地 使种子表面完全被水浸润，防止浸润不彻底出现种子表面仍然存在部分气泡， 尤其小麦种子的腹沟处。

(3)浸种灭菌：将清洗过的种子倒入三角瓶中，加入1％的次氯酸钠溶 液，使之浸没种子0.6至1.5厘米，浸种灭菌时长为8至12分钟。

(4)恒温浸种：用清水冲洗掉种子表面的次氯酸钠溶液后将种子放置在 培养箱的白盒中，并向白盒内加入清水至浸没种子0.6至1.5厘米，调节培养 箱调至25摄氏度恒温后，黑暗条件下浸种6小时。

(5)催芽；恒温浸种结束后，倒掉培养箱白盒中的水，取出种子，并将 种子平铺在条状湿毛巾的中间位置，使两侧毛巾翻过来包盖住种子，然后将 包有种子的湿毛巾放入培养箱的白盒里，调节培养箱至30摄氏度恒温，并于 黑暗环境中放置18个小时，进行催芽，期间需保证毛巾始终处于湿润状态。

(6)二次选种：催芽结束后，在湿毛巾上直接剔除未露白及外表颜色不 一致的小麦种子。

(7)摆种：二次选种后得到的小麦种子，用尖头镊子将其整齐摆放在浮 筏上，所述浮筏包括塑料浮漂制成的围框以及缝合在围框内的硬质尼龙纱网， 使小麦种子的腹沟向下接触尼龙纱网，粒间距控制在2.5至3.5毫米，行间距 控制在0.8至1.2厘米。

(8)催苗：摆种完毕后，将浮筏移至培养箱的发芽盒中，用注射器将60 毫升的清水顺着发芽盒的侧边缓慢注入，并覆盖子，培养箱调节至25摄氏度 恒温，全光照培养24小时。

然后去掉发芽盒上的盖子后，调节培养箱程序为：

25摄氏度，全光照培养14小时；20摄氏度，全光照培养10小时；

当种子出芽0.8至1.3厘米时，向发芽盒中补充已经经过通气处理的清水 1至1.5升，并每两天更换一次清水。

(9)剔苗：自种子出芽1厘米后一直到第8天育苗的期间内，根据麦苗 的胚芽鞘颜色、长度，叶片颜色、卷曲程度、有无干叶尖现象，麦苗在群体 中的株高状况以及苗的粗细等因素进行综合判断，剔除疑似杂株、畸形苗、 过高、过矮及弱苗。

(10)育苗：至第8天后，挑选整齐一致的壮苗，去掉根部残余的种子 后，用清水冲洗干净根部残余淀粉后作如下处理：

随机拿取幼苗，将其转移到提前准备好的已经按照试验需求打孔的泡沫 板上，每孔1-2株，并用海绵块包裹麦苗的胚芽鞘部位后固定在泡沫板的孔中； 随后将带苗的泡沫板转移至外表面涂黑漆的大盒中，用1/2Hoagland营养液 培养；

泡沫板在1/2Hoagland营养液中培养1天之后改用Hoagland营养液培养， 培养条件为：以24小时为周期，22摄氏度，全光照14小时，15摄氏度，黑 暗条件下10小时；