[发明专利]从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法及其应用

权利要求书

1.一种从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)超低温粉碎：取干燥的三棱为原料，进行超微粉碎5～20min，得到超微粉；

(2)乙酸乙酯提取：在超微粉中加入乙酸乙酯，超微粉与乙酸乙酯的料液比为1︰(8～10)，70～75℃加热1～3小时进行提取，离心取沉淀重复1～3次，合并提取的上清并浓缩干燥，为粗提组分；

(3)色谱分离：

(a)一维分离：取粗提组分用40％乙醇-正己烷溶液20～60℃超声溶解至浓度为60～100mg/ml，过膜后通过高压制备液相色谱进行分离，采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用A流动相为正己烷、B流动相为乙醇的二元流动相体系，进样量为100～150mL/针，流动相流速为550～600mL/min，洗脱方式为B相浓度由0％至30％梯度洗脱，检测波长为210～280nm，根据紫外吸收光谱收集10-17.5min洗脱液作为目的组分，经浓缩后真空冷冻干燥，得到一维液相组分；

(b)二维分离：取一维液相组分用40％乙醇-正己烷溶液20～60℃超声溶解至浓度为60～100mg/ml，过膜后通过高压制备液相色谱进行分离，采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用A流动相为正己烷、B流动相为乙醇的二元流动相体系，进样量为1～4mL/针，流动相流速为12～16mL/min，洗脱方式为B相浓度5％等度洗脱，检测波长为210～280nm，根据紫外吸收光谱收集24.3-26min洗脱液作为目的组分，经浓缩后真空冷冻干燥，得到本发明抗肿瘤活性组分。

2.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(1)中超微粉碎时间为12min。

3.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(2)中乙酸乙酯提取的提取温度为72℃。

4.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(2)中超微粉与乙酸乙酯的料液比为1︰8。

5.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(3)(a)中粗提组分溶解于40％乙醇-正己烷溶液的浓度为80mg/ml。

6.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(3)(a)一维分离中色谱柱的直径为150mm，柱长为250mm，其中硅球粒径为10μm，孔径为10nm。

7.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(3)(b)二维分离中一维液相组分溶解于40％乙醇-正己烷溶液的浓度为80mg/ml。

8.根据权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法，其特征在于：所述步骤(3)(b)二维分离中色谱柱的直径为20mm，柱长为250mm，其中硅球粒径为10μm，孔径为

9.权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法得到的抗肿瘤活性组分在制备抗肺癌药物中的应用。

10.权利要求1所述的从三棱中提取抗肿瘤活性组分的方法得到的抗肿瘤活性组分在制备抗肝癌药物中的应用。