[发明专利]一种从牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物方法

说明书

本发明公开了一种牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物的方法，其提取纯化方法主要包含：取一定量的牛胆膏粉，用95％的乙醇浸泡(牛胆膏∶乙醇＝1∶2)，在超声波提取器中提取；提取液中加入乙酸乙酯放置30min沉淀，过滤，浓缩，冷冻干燥备用。称取一定量处理过的大孔树脂于玻璃层析柱中，将牛胆粉提取物冻干粉用40％乙醇溶解，然后缓慢加入溶解液于析柱中，洗脱过滤，浓缩，冷冻干燥得产品。采用超声提取牛胆粉提取率高，提取时间较短，工艺操作简便。本发明采用了大孔树脂法分离纯化牛胆粉提取物，该方法分离、纯化、富集的作用好，方便鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的提取纯化。

技术领域

本发明涉及药物成分提取领域，特别地，涉及一种牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物的方法。

背景技术

牛胆汁是牛科动物黄牛Bostaurus domesticus Gmelin或水牛Bubalus L.的胆汁。牛胆汁的药用，始载于汉代的《神农本草经》一书，列为中品，后世本草亦时有论述。本品味苦性寒，具有清肝明目，利胆通肠，解毒消肿之功效，广泛用于治疗肝热目赤肿痛，小儿惊风，痈肿疮毒及便秘、消渴等疾病。牛胆粉(干燥胆汁)又为蒙药特色药材，蒙药名为乌和仁-苏素，具有平息协日、愈伤、解毒、明目之功效。蒙医临床用于协日病、配毒症疗效显著。目前认为牛胆粉中主要含有胆红素、胆汁酸、胆固醇、无机元素、蛋白及氨基酸等成分。

牛胆汁中含有多种胆酸类化学成分，其中包括鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸及猪去氧胆酸，但其含量较低。

鹅去氧胆酸在临床上不仅用溶解胆固醇类结石和纠正饱和胆汁的药物，还具有显著地平喘、抗炎、镇咳和祛痰等作用。鹅去氧胆酸也是昂贵的熊去氧胆酸的合成原料，它们都是治疗胆道疾病的有效药物。

熊去氧胆酸具有细胞膜稳定作用，对肝脏毒性物质具有解毒作用，同时增加肝低密度脂蛋白的摄取，从而增加肝细胞脂质的输出，同时增加脂肪酸氧化或甘油三脂转化，缓解肝细胞脂肪变性。

猪去氧胆酸具有降血脂、镇痉、祛痰等作用，为人工牛磺的重要成分，临床上可用于治疗高血脂症、气管炎以及由肝胆疾病引起的消化不良，对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌亦有抑制作用。

现有技术中没有从牛胆粉中提取有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物技术工艺报道。

1.本发明只是从牛胆粉中制备鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物；主要利用的是大孔树脂；

2.这些大孔树脂只在我们的研究中应用过，别人还没有报道；

3.大孔树脂的优势主要是富集微量的化合物，在我们的研究中主要是利用树脂的富集和纯化作用。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物的方法。

特别地，所述从牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物的方法是利用大孔树脂有效提取、有效除渣、有效富集、有效纯化的工作原理；利用物美价廉的不用浓度的乙醇达到最后总提取物的纯化；提纯之后的总提取物可以进行蒙药制剂剂型的改革研究，具体步骤包括：

(1)牛胆粉95％乙醇超声提取(超声频率50-80Hz)：取一定量牛胆粉加入一定体积95％乙醇(物料比例1∶2)超声提取3次，每次1h，每一次超声提取结束后，提取液上加适量乙酸乙酯放置30min沉淀，等完全沉淀后用布氏漏斗过滤，沉淀再加95％乙醇继续第二次提取，以上方法提取三次。最后合并过滤液。

(2)回收浓缩：回收浓缩滤液，浓缩至没有乙醇味。

(3)冷冻干燥：浓缩液冷冻干燥，得牛胆粉冻干粉。

(4)牛胆粉冻干粉40％乙醇超声(超声频率50-80Hz)溶解，备用。