[发明专利]高耐受细胞株的筛选方法

权利要求书

1.一种高耐受细胞株的筛选方法，包括：选取可生长细胞株，将其进行体外培养，改变 细胞培养条件从而迫使细胞在不良生长环境中生长代谢，进而筛选获得适应于所述不 良生长环境的高耐受细胞株，其特征在于，所述改变的细胞培养条件包括：细胞培养 液的渗透压、乳酸浓度、氨浓度、pH值、溶氧浓度或搅拌速度，或者所述细胞培养条 件的两种或两种以上的任意组合。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变两种或两种以上所述的细胞培养条件。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的改变的细胞培养条件中至少有两种分 别进行改变。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是逐步提高渗透压使得预 定的细胞生长参数达到预定的极限值。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是逐步提高乳酸浓度使得 预定的细胞生长参数达到预定的极限值。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是逐步提高氨浓度使得预 定的细胞生长参数达到预定的极限值。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是同时逐步提高乳酸浓度 和氨浓度使得预定的细胞生长参数达到预定的极限值。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是逐步提高pH值使得预定 的细胞生长参数达到预定的极限值。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，改变细胞培养条件是逐步提高搅拌速度使得 预定的细胞生长参数达到预定的极限值。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，把所述的细胞培养条件直接调整到预定的值。

11.如权利要求4至9的任意一个所述的方法，其特征在于，所述预定的细胞生长参数为 细胞活性，预定的极限值是指细胞活性低于50％。

12.如权利要求4至9的任意一个所述的方法，其特征在于，所述预定的细胞生长参数为 细胞倍增期，预定的极限值是指细胞倍增期无法保持稳定。

13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞株是哺乳动物细胞株。

14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，进一步用无血清克隆化方法对获得的细胞进 行筛选，获得生长代谢稳定的高耐受细胞株。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述高耐受细胞株所表达的产物质量合格。

16.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在低营养物浓度的条件下对所述细胞株进行 筛选。

17.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在高细胞密度的条件下对所述细胞株进行筛 选。