[发明专利]阿胶药材及其水提取物的多展开剂快速薄层鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种阿胶药材及其水提取物的多展开剂快速薄层鉴别方法。

背景技术

阿胶是由动物驴的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶，为中国药典历版所收载品种，具补血滋阴，润燥，止血的功效，用于治疗血虚萎黄、眩晕心悸、肌萎无力、心烦不眠、虚风内动、肺燥咳嗽、咯血吐血、尿血便血、崩漏、妇女月经不调、妊娠胎漏等症。主含骨原胶，水解后为多肽与多种氨基酸，具有滋阴补血功效，是一种临床上的常用药材。

从中国药典2005年版开始收入薄层鉴别，是以甘氨酸对照品为对照，苯酚-0.5％硼砂溶液(4∶1)为展开剂，茚三酮试液为显色剂。其供试品溶液制备，是将阿胶，用盐酸水解为氨基酸后，再进行薄层鉴别，操作起来很不方便。曾有人因操作上的难度，以商榷的方式发表论文，谈到薄层鉴别的3大缺陷，1.展开剂配制困难，因为苯酚呈固体状态，加热取用很不方便，加之硼砂不溶于苯酚中。2.薄层展开时间与薄板晾干时间太长，展开要7.5-8小时，晾干要70-80分钟。3.显色时间也长，要30-40分钟。

或许是因为上述原因，中国药典2015年版进行了鉴别修订，修订为采用液质联用鉴别阿胶，样品前处理仍然很麻烦，要加胰蛋白酶酶解阿胶后，以梯度洗脱方式，质谱检测器，电喷雾正离子模式，进行多反应检测，选择质荷比(m/z)539.8(双电荷)→612.4和m/z539.8(双电荷)→923.8作为检测离子对。以规定的离子对在提取的供试品离子流色谱中，应同时呈现与对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。

仪器昂贵，操作复杂，一台液质联用仪少说也要100多万元。试想，有多少阿胶生产企业会为了一项定性鉴别，购置一台液质联用议呢？方法又如何普及推广应用呢？只能批批委托有条件的单位代检，方法的普及推广应用受到了很大程度的限制。

查阅文献得知，目前都是检测的水解之后的氨基酸，展开剂多是正丁醇系列，不但有严重的刺激味。而且展开时间太长，溶剂不易挥干。还未发现阿胶简便、快捷、鉴别其原有成分的薄层鉴别方法报道。

为此，按有关薄层鉴别要尽量鉴别药材或制剂原成分的原则，对阿胶及其水提取物的原有化学成分进行了专题薄层鉴别研究。获得以三种不同展开剂，鉴别阿胶原有化学成分的快速薄层鉴别方法。因为展开剂不同，溶解、分离化学成分的性能不一样，得到的薄层图谱也会不同。不同的薄层图谱，提供了不同组方的阿胶制剂，为排除干扰成分，获得阿胶原有成分检测的快速鉴别方法，提供了可供选择的图谱、展开剂与操作手段。

阿胶药材水提取物或配方颗粒的制备方法取阿胶，适当粉碎，称取14000-15000g，分别加水8倍量，煎煮提取二次，每次1-2小时，滤过，滤液70℃减压浓缩，浓缩液喷雾干燥或70℃减压干燥，得水提取物干膏粉；或加糊精适量，混匀，制粒，分别制成1000g，分装，得水提取物配方颗粒。

发明内容

本发明就是针对阿胶目前薄层鉴别都是检测水解后的氨基酸成分，且方法与展开剂配制，都存在一定的不方便性。中国药典2015年版新修订的液质联用法，又涉及到仪器昂贵，在一般的制药企业很难拥有，无法推广应用，且被检测成分还是水解后的氨基酸，检测指标与临床所用阿胶原有成分不一致，难以真实反映阿胶质量。为此，经过大量的试验探讨研究，发明了样品与对照药材简便、快捷，只需70％甲醇超声，滤液或上清液点样，展开，显色，检视阿胶原有成分的多展开剂快速薄层鉴别方法。在三种展开剂中，其紫外光灯365nm下的荧光斑点，即，图1、3、5的荧光斑点，不是同一种成分，图1的荧光斑点，遇10％硫酸乙醇溶液也呈现颜色，图5的2个荧光斑点，遇10％硫酸乙醇溶液是不呈现颜色的。但透过灯光检视的含量最高的棕褐色主斑点在三种展开剂中都是同一成分，即，图2、4、6的棕褐色斑点，是随着展开剂的极性大小，Rf值由小变大。三种展开剂至少可以检出5种原有成分。为不同组方的阿胶制剂，提供了选择排除干扰，获得阿胶原有成分检测的快速鉴别方法。

本发明解决其技术问题所采用的方案为：

(1)以体积比5∶3∶5∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂