[发明专利]一种新的贝壳杉烷类二萜化合物及其制备方法和治疗肝癌的医药用途

说明书

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体涉及从冬凌草的干燥全草中分离得到的一种具有治疗肝癌作用的贝壳杉烷类二萜化合物及其制备方法。

背景技术

冬凌草系唇形科植物碎米桠Rabdosiarubescens(Hemsl.)Hara的全草，主要分布在于河南及黄河流域以南。其味甘苦，性微寒。有清热解毒、消炎止痛，健胃活血等功能，主要用于咽喉肿痛、扁桃腺炎、蛇虫咬伤等症。该植物抗肿瘤作用良好，毒性不明显，被誉为“紫杉醇第二”。

冬凌草中含有单萜、二萜、三萜等萜类化合物，此外还含有挥发油、甾体、黄酮、生物碱、氨基酸、有机酸、单糖等成分。二萜类成分是冬凌草的主要成分，主要骨架构型包括对映贝壳杉烷型(ent-kaurane)和螺断贝壳杉烷型(seco-ent-kaurane)两大类。

抗肿瘤作用是冬凌草最重要药理作用，冬凌草中的许多二萜类成分对癌细胞都有抑制作用，其中最主要抗癌活性成分为冬凌草甲素(ORI)和冬凌草乙素(PON)，一些多糖类物质也具有抗肿瘤活性。体外实验表明，冬凌草对20多种肿瘤细胞等都有较强抑制作用。冬凌草甲素对小神经胶质细胞引起的致炎作用和神经功能紊乱有调节作用，用脂多糖对大鼠小神经胶质细胞进行刺激，结果发现冬凌草甲素可以通过减少NO、TNF-α、IL-1β、IL-6释放停止或减轻炎症反应，同时抑制DNA与逆转录酶因子NF-κB结合，另外冬凌草甲素对神经营养因子有正调节作用。研究还发现冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌及甲、乙型溶血性链球菌有明显抗菌作用。冬凌草多糖具有抗肿瘤作用及其免疫活性。冬凌草甲素能明显清除黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧自由基以及Fenton反应中的羟自由基。冬凌草甲素对多形核白细胞(PMN)呼吸爆发时产生活性自由基同样显示明显清除作用。冬凌草还具有降压作用和抗突变作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种从冬凌草的干燥全草中分离得到的一种具有治疗肝癌作用的贝壳杉烷类二萜化合物及其制备方法。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将冬凌草的干燥全草粉碎，用80～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。

进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。

进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85％。

一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。

所述的化合物(Ⅰ)在制备治疗肝癌的药物中的应用。

所述的药物组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。

本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。

该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。

所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。

附图说明

图1为化合物(Ⅰ)结构式；

图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较；

图3为化合物(Ⅰ)对HepG2及L02细胞增殖的影响(n＝3)。

具体实施方式