[发明专利]聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法在审
申请号: | 201510674865.0 | 申请日: | 2015-10-19 |
公开(公告)号: | CN105175566A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
发明(设计)人: | 刘颖;于晓红;窦博鑫 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨商业大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 哈尔滨龙科专利代理有限公司 23206 | 代理人: | 高媛 |
地址: | 150028 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚酰胺 树脂 柱联柱法 去除 西洋参 多糖 提取物 蛋白质 色素 方法 | ||
1.一种聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述方法步骤如下:
(1)称取一定量的西洋参粗多糖,用去离子水在30~60℃的水浴锅中震摇溶解,使得多糖浓度在1~20mg/ml,离心去除不溶物后作为粗糖原液备用;
(2)选用Ф26mm×600mm的层析柱×2,分别填入150~300ml处理好的聚酰胺和大孔树脂,并串联两柱,先用3~4倍柱体积去离子水从聚酰胺柱端进行平衡,将配置好的西洋参粗多糖原液,从聚酰胺柱端进行上样,吸附平衡一定时间后,再用去离子水洗脱,收集洗脱液,真空浓缩,冷冻干燥后得到无色无蛋白多糖,控制上样量为1~5g,上样体积为0.5~2.5BV,吸附平衡时间为10~60min,洗脱速率为2~10mL/min。
2.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述西洋参粗多糖的制备方法如下:
(1)西洋参整根经生物粉碎机粉碎,过筛,得西洋参粉;
(2)取干燥至恒重的西洋参粉以料液比1:10~40g/ml加入60~95%的乙醇60~90℃水浴回流1~6h,离心弃上清液,沉淀重复1~3次,烘干沉淀以料液比1:10~40g/ml加入蒸馏水在60~100℃水浴回流提取1~6h,离心收集沉淀,沉淀重复1~3次,合并上清液;
(3)浓缩上清液,加入乙醇使醇浓度达60~95%置于冰箱中2~6℃醇沉至4~12h;
(4)离心后得沉淀经无水乙醇、无水乙醚、丙酮依次洗涤后减压冷冻干燥得西洋参粗多糖干品。
3.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述大孔树脂柱为S-8。
4.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述上样量为3.0g。
5.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述上样体积为1BV。
6.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述吸附平衡时间为20min。
7.根据权利要求1所述的聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法,其特征在于所述洗脱速率为6ml/min。
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