[发明专利]一种铁皮石斛的快速繁殖方法

权利要求书

1.一种铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)将铁皮石斛蒴果消毒灭菌后剖开，取出铁皮石斛蒴果种子；

(2)将步骤(1)中得到的铁皮石斛种子均匀播撒于种子萌发培养基上，20～25℃下暗培养6～8天后，正常培养60～75天，铁皮石斛种子萌发成铁皮石斛幼苗；

(3)将步骤(2)中得到的铁皮石斛幼苗接种到原球茎分化培养基中培养80～100天，得到铁皮石斛分化苗；

(4)将步骤(3)中得到的铁皮石斛分化苗转接到壮苗生根培养基上培养后90～100，得到铁皮石斛组培苗。

2.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的铁皮石斛蒴果为15～20周的成熟未开裂蒴果。

3.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中，消毒灭菌的方法为：将铁皮石斛蒴果用水冲洗并干燥后，于70～75％体积分数的乙醇水溶液中浸泡45s，取出后用无菌水冲洗2～3次；再将蒴果放入0.1％质量分数的氯化汞水溶液中浸泡10min，取出后用无菌水冲洗4～6次；最后用灭菌后的滤纸吸干蒴果表面的水分。

4.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的种子萌发培养基的配方为：MS+0.2-0.5mg/L萘乙酸+0.5-1.0mg/L6-苄氨基腺嘌呤+50-100g/L土豆+25g/L蔗糖+6.0g/L琼脂粉，pH5.8～6.0。

5.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的正常培养的条件为温度20～25℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为10～12h/d。

6.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的原球茎分化培养基的配方为：N6大量元素+MS微量元素+MS有机物+0～1.0mg/L萘乙酸+50-100g/L香蕉+25g/L蔗糖+6.0g/L琼脂粉，pH5.8～6.0。

7.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，培养条件为温度20～25℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为10～12h/d。

8.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的壮苗生根培养基的配方为：N6大量元素+MS微量元素+MS有机物+0～1.0mg/L萘乙酸+50～100g/L香蕉+0.5～2.0g/L活性炭+25g/L蔗糖+6.0g/L琼脂粉，pH5.8～6.0。

9.根据权利要求1所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(4)中，培养条件为温度为20～25℃，光照强度为2000～2200Lux，光照时间为10～12h/d。

10.根据权利要求4、6和8所述的铁皮石斛的快速繁殖方法，其特征在于，所述的MS培养基的配方为：

大量元素：硝酸铵1650mg/L、硝酸钾1900mg/L、二水合氯化钙440mg/L、七水合硫酸镁370mg/L和磷酸二氢钾170mg/L；

微量元素：四水合硫酸锰22.3mg/L、七水合硫酸锌8.6mg/L、六水合氯化钴0.025mg/L、五水合硫酸铜0.025mg/L、碘化钾0.83mg/L、硼酸6.2mg/L、七水合硫酸亚铁27.8mg/L和乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；

有机物：烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、甘氨酸2mg/L和肌醇100mg/L；

所述的N6大量元素配方为：硝酸钾2830mg/L、硫酸铵463mg/L、二水合氯化钙166mg/L、七水合硫酸镁185mg/L和磷酸二氢钾400mg/L。