[发明专利]促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液及方法有效
| 申请号： | 201510618919.1 | 申请日： | 2015-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN105219706B | 公开（公告）日： | 2018-09-04 |
| 发明（设计）人： | 王一飞;陈海佳;葛啸虎;马岩岩;张维敏 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12P21/00 |
| 代理公司： | 北京市盈科律师事务所 11344 | 代理人： | 刘雪花 |
| 地址： | 510000 广东省广州市广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 促牙周膜间充质 干细胞 分泌 因子 培养液 方法 | ||
1.一种促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，所述促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液为含蛋白终浓度50-200μg/ml的条件培养基、10％FBS的DMEM/F12培养液，条件培养基为培养过牙周膜间充质干细胞的培养液。
2.根据权利要求1所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，所述促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液为含蛋白终浓度100μg/ml的条件培养基、10％FBS的DMEM/F12培养液。
3.根据权利要求1所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，条件培养基通过以下方法制备：取P1-P5代牙周膜间充质干细胞，采用含10％FBS的DMEM/F12培养液置于37℃、5％CO2条件下培养，当汇合度达到80-90％时，换成无酚红DMEM培养基，继续培养48-72h后，收集细胞培养上清；浓缩收集的上清得到条件培养基。
4.根据权利要求3所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，采用P2或P3代牙周膜间充质干细胞培养制备条件培养基。
5.根据权利要求3所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，换成无酚红DMEM培养基后，继续培养60-72h。
6.根据权利要求3所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，其特征在于，浓缩后条件培养基蛋白浓度为2-5mg/ml。
7.一种促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的方法，其特征在于，包括以下步骤：取P1-P5代的牙周膜间充质干细胞加入含10％FBS的DMEM/F12培养液置于37℃、5％CO2条件下培养，待细胞汇合度达到80-90％时，换成权利要求1-6任一项所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液，继续培养12-48h。
8.根据权利要求7所述的促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的方法，其特征在于，换成促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液后继续培养24h，所述促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液为含蛋白终浓度100μg/ml的条件培养基、10％FBS的DMEM/F12培养液。
9.根据权利要求7所述的促牙周膜间充质干细胞抗炎因子分泌的方法，其特征在于，使用促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液促进P2或P3代牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子。
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