[发明专利]一种三倍体矮牵牛的培育方法

说明书

技术领域

本发明属于园艺植物遗传育种领域，特别涉及一种三倍体矮牵牛的培育方法。

背景技术

矮牵牛(PetuniahybridaVilm.)为茄科碧冬茄属植物，为一年生草本花卉。矮牵牛花朵硕大，色彩丰富，花型变化颇多，目前矮牵牛在国际上已成为主要的盆花和装饰植物，广泛应用于庭院、露天花坛、广场的美化装饰与绿化，被喻为“世界花坛花卉之王”。我国矮牵牛于20世纪初开始少量引种栽培，80年代逐渐从欧美等国引进新品种进行规模种植，现在随着经济发展和城市建设需要对矮牵牛需求越来越大，目前国内广泛种植的优良矮牵牛品种如重瓣“双瀑布”系列、大花“梦幻”系列、多花单瓣“庆典”系列和吊蓝等系列都为国外培育的二倍体品种。

通过倍性育种可使植物基因组多倍化获得生长势旺盛、适应性强、抗逆性好的品种，应用于观赏植物可提高花卉的观赏性与品质。三倍体是指体细胞中含有三个染色体组，不但具有多倍体的优良特性而且可以利用杂种优势、获得无籽果实，并且作为遗传育种桥梁材料选育出的系列单体和三体可应用于染色体上基因定位、确定基因连锁群等遗传研究。培育三倍体一般先诱导形成遗传稳定的四倍体，再由四倍体和二倍体杂交获得三倍体，此法育种周期较长。迄今为止，还没有三倍体矮牵牛(2n＝3x＝21)培育方法的公开报道。

发明内容

发明目的：本发明要解决的技术问题是提供一种三倍体矮牵牛的培育方法。此种方法育种周期短、操作简便诱变效率高。

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种三倍体矮牵牛的培育方法，该方法包括如下步骤：

1)选择杂交优势较强的二倍体组合作为亲本，按常规技术种植；

2)在亲本进入花期时，用化学诱导剂诱导父本植株上的花蕾，使之产生2n花粉；

3)诱导后花蕾纵轴长度生长至1.5cm～2.6cm时，采摘放置于低温、干燥、黑暗处保存；

4)杂交前对母本进行去雄处理，将步骤3)中诱导花蕾中的2n花粉取出，涂于母本去雄花蕾的柱头上，植株结实后得到F1杂交种子；同时将父本没有经过诱导处理的n花粉涂于母本去雄花蕾的柱头上，植株结实后得到对照二倍体F₁杂交种子；

5)将F₁杂交种子生长至成植，筛选出三倍体植株。

其中，上述的化学诱导剂为秋水仙素、氨磺灵和氟乐灵的混合药液。秋水仙素的最终质量浓度为0.1％～0.5％，氨磺灵最终质量浓度为20mg.L^-1～50mg.L^-1，氟乐灵最终质量浓度为50mg.L^-1～100mg.L^-1。

其中，上述步骤2)诱导的方法为：上午8～10时温室大棚内温度控制在22～33℃，选择父本植株上纵轴长度为2.2mm～3.4mm花蕾，用微量注射器将化学诱导剂混合药液注入花蕾内，每次10～15μL，连续1～3天。

步骤3)具体方法为：采摘经诱导处理纵轴长度生长至1.5cm～2.6cm的花蕾，放置于密闭的容器中(内含无水氯化钙或无水硫酸镁或硅胶等干燥剂)，并用黑色遮光物覆盖，将容器放置于冷柜中温度设置为3～10℃，可存放1～3天，等待授粉的合适时机。

步骤4)中，杂交前对母本进行去雄处理，是指杂交前选择母本植株上纵轴长度达2.5厘米或以上的未开花花蕾，对花蕾进行去除雄蕊后套袋隔离，1～3天后进行杂交授粉；父本没有经过经过诱导处理的n花粉，是指选择父本植株上没有经化学药剂处理、纵轴长度达2.5厘米或以上的未开花花蕾，进行套袋隔离，1～2天后取花粉进行授粉。

其中，上述步骤5)的筛选方法为：将F₁杂交种、对照二倍体F₁杂交种按常规技术种植，成株后先进行农艺性状、解剖学比较，选择多倍体特征明显的植株，再进行细胞学染色体检测确定三倍体植株。

其中，上述步骤1)中杂交优势较强的二倍体组合是指F₁杂交后代的株高、冠幅、茎粗、叶面积、开花数的农艺性状超过双亲。

其中，上述步骤3)中，低温、干燥黑暗处是指3～10℃、干燥剂干燥和遮光。

其中，上述步骤5)中农艺性状为：叶片长度与宽度、叶面是否扭曲、茎粗、株高、冠幅、萼片长度与宽度、柱头和花药大小、花瓣直径、花瓣边缘褶皱程度。