[发明专利]一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体的是一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法，包括种苗出瓶后的栽培管理技术。

背景技术

肉饼类兜兰(Paphiopedilumhybrid)是兰科(Orchidaceae)兜兰属植物杂交种，其花型奇特且较大，花色艳丽，是一种目前市场上较为流行的兜兰栽培种。

兜兰属植物杂交种比原生种花型花姿更为优美，花色更为丰富艳丽，其抗逆性也更强。在国际市场上，以兜兰为亲本的杂交花卉深受人们的喜爱，已成为世界兰花产业的一大支柱，取得了巨大的经济效益。但我国肉饼类兜兰的杂交育种工作才刚刚起步。因此，利用我国丰富的兰科植物资源，进行肉饼类兜兰的杂交育种不仅优势明显而且很有意义。

此外，肉饼类兜兰虽具有很高的杂交亲和性，但由于其杂交种子无胚乳或胚发育不完全，在自然状态下萌发率极低且原球茎褐化率偏高，而利用生物技术可以有效提高萌发率并达到快速生产健康种苗的目的。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法，包括种苗移栽后的栽培管理措施，解决了肉饼类兜兰因种子发芽率较低而繁殖速度慢的问题，为兜兰新品种的选育提供了具体的操作方法。

本发明所提供的技术方案是：

一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法，包括以下步骤：

(1)人工授粉：选肉饼类兜兰(Paphiopedilumhybrid)作为母本，自交、同一品种内不同株系间杂交或不同种内种间杂交，在花朵开放4-15d后进行人工授粉，授粉后生长得到蒴果；

(2)种子成熟度的选择：选择生长300-360d的充分膨大蒴果作为种子；

(3)果荚的消毒与播种：剪取果荚后用自来水洗净，经中性洗涤剂冲洗，酒精搽拭，流水冲洗15min后转入超净工作台内，再用75％酒精消毒30s，1％次氯酸钠溶液浸泡12min，之后再用无菌水冲洗6次，切开果荚将种子均匀撒于萌发培养基表面进行培养；

(4)种子萌发形成原球茎并分化成小苗：播种后在正常条件下培养，10d后种子开始膨大形成无色透明或白色的原球茎，20d达到萌发高峰，原球茎在萌发培养基上再经分化形成小苗；

(5)壮苗培养：将原球茎分化形成的小苗转接到壮苗生根培养基上培养，在温度25-28℃、光照强度30μmol·m^-2·s^-1、光照时间12h·d^-1的条件下，20-30d转接1次，培养两个周期40-60d形成健壮的植株；

(6)炼苗移栽：将根系生长良好、叶片长3-7cm的植株转移到自然光下炼苗10d，然后将其从壮苗生根培养基中取出，洗净根部的培养基，移栽至基质中培养；

(7)苗期栽培管理：不同的苗龄采用不同的栽培管理措施。

作为优选，本发明的技术方案中，步骤(4)中所述的种子萌发培养基含：1/2-1/8MS、椰子汁50-300ml·L^-1、活性炭0.5-2.0g·L^-1、蔗糖20-30g·L^-1和琼脂3.5-6.0g·L^-1，其pH为5.0-5.5。

作为优选，本发明的技术方案中，所述的椰子汁用1.0-3.0g·L^-1蛋白胨替代。

作为优选，本发明的技术方案中，步骤(4)中播种后正常条件下进行培养：光照强度30-40umol·m^-2·s^-1，光照周期12h·d^-1，培养温度为25±2℃。

作为优选，本发明的技术方案中，步骤(5)中所述的壮苗生根培养基含：1/2-1/8MS、花宝1号0.5-2.0g·L^-1、花宝2号0.5-2.0g·L^-1、蛋白胨1.0-3.0g·L^-1、香蕉20-100g·L^-1、土豆50-150g·L^-1和IBA0.1-2.0g·L^-1。

作为优选，本发明的技术方案中，所述的花宝1号N:P:K含量比为7:6:19；花宝2号N:P:K含量比为20:20:20。