[发明专利]金黄地鼠肾原代细胞培养液在审
| 申请号: | 201510510230.7 | 申请日: | 2015-08-19 |
| 公开(公告)号: | CN105062955A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
| 发明(设计)人: | 戚凤春;杨宪普;贾雷;张涛;王红霞;张志红;陈巧燕 | 申请(专利权)人: | 河南远大生物制药有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人: | 王霞 |
| 地址: | 450001 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 金黄 地鼠 肾原代 细胞 培养液 | ||
1.一种金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所述培养液的组分包括Hanks’平衡盐溶液、水解乳蛋白、L-谷氨酰胺、L-盐酸半胱氨酸、新生牛血清、硫酸庆大霉素/卡那霉素;其配制过程如下:
第一步,配制Hanks’平衡盐溶液
取Hanks’平衡盐,加注射用水,充分溶解后得到Hanks’平衡盐溶液备用;
第二步,配制营养液
按比例称量水解乳蛋白90份,L-谷氨酰胺4份,L-盐酸半胱氨酸1.9份,用注射用水将其充分溶解后得到营养液备用;
第三步,配制培养液
将第一步配制的Hanks’平衡盐溶液和第二步配制的营养液按比例分别在无菌状态下过滤到配液罐中,然后将新生牛血清75~120份和硫酸庆大霉素溶液/卡那霉素溶液6份分别过滤至配液罐中,添加注射用水定容,搅拌均匀后即可得到金黄地鼠肾原代细胞培养液。
2.根据权利要求1所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所用注射用水的温度为31~37℃。
3.根据权利要求1所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所述第一步中配制的Hanks’平衡盐溶液为5~20倍浓缩液;所述第二步中配制的营养液为5~15倍浓缩液。
4.根据权利要求3所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所述Hanks’平衡盐溶液为10倍浓缩液;所述营养液为10倍浓缩液。
5.根据权利要求1所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:第三步中所述的新生牛血清的浓度为7.5-12%。
6.根据权利要求5所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所述新生牛血清的浓度为8.5%。
7.根据权利要求1所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:第三步中如果添加硫酸庆大霉素溶液,则其终浓度为20~30IU/ml;如果添加卡那霉素溶液,则其终浓度为40~50IU/ml。
8.根据权利要求7所述的金黄地鼠肾原代细胞培养液,其特征在于:所述硫酸庆大霉素溶液的终浓度为24IU/ml;所述卡那霉素溶液的终浓度为45IU/ml。
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