[发明专利]一种乙醇-酶体系预处理结合水提法提取灵芝子实体中β-葡聚糖的方法

说明书

本发明公开了一种乙醇‑酶体系预处理结合水提法提取灵芝子实体中β‑葡聚糖的方法，包括以下步骤：1)将灵芝子实体粉碎，进行乙醇‑酶体系预处理；2)离心获得预处理后的灵芝子实体滤渣；3)对预处理后的灵芝子实体滤渣进行热水提取β‑葡聚糖，经离心获得含粗β‑葡聚糖的上清液；4)在上清液中加入α‑1,4‑葡萄糖水解酶对α构型多糖进行处理；5)产品回收：对α‑1,4‑葡萄糖水解酶处理液进行醇析，经离心收集沉淀部分即为灵芝β‑葡聚糖。本发明技术条件温和、工艺简单、所得产品灵芝β‑葡聚糖的得率高，是一种实用的灵芝重要多糖组份(β‑葡聚糖)的提取技术。

技术领域

本发明涉及药用真菌β-葡聚糖提取技术领域，具体地说涉及一种乙醇-酶体系预处理结合水提法提取灵芝子实体中β-葡聚糖的方法。

背景技术

灵芝为真菌担子菌亚门Basidiomycotina层菌纲Hymenomycetes多孔菌目Polyporales多孔菌科Polyporaceae灵芝属Ganoderma赤芝种Ganoderma lucidum，最近其学名订名为Ganoderma lingzhi。灵芝子实体自古作为一味名贵中药，在古代曾被称为“仙草”，始载于汉《神农本草经》。灵芝多糖是灵芝的主要功效成分之一，其中灵芝β-构型的多糖是灵芝多糖中最具活性的成分，具有提高免疫、抗肿瘤、抗氧化、降血糖和血脂等多种药理作用。

已有灵芝总多糖或粗多糖的提取技术报道，但灵芝中β-葡聚糖的提取技术报道较少，同时也没有在灵芝β-葡聚糖提取过程中采取乙醇-酶体系预处理技术的报道。

文献：李靖.响应面优化灵芝多糖提取研究(食品工业,2013)报道了灵芝子实体中多糖的超声波法提取技术，但是灵芝总多糖的提取技术，没有针对灵芝β-葡聚糖的的相关提取技术，更没有乙醇-酶体系预处理技术报道。

文献：孙小梅,戴军,陈尚卫,朱松.灵芝子实体多糖提取方法优化及不同来源赤芝子实体的多糖分子质量比较(食品与发酵工业,2014)报道了灵芝子实体中多糖的超声波辅助、微波辅助、加速溶剂萃取以及水浴回流4种提取技术，但均是针对灵芝总多糖的提取技术，没有针对灵芝β-葡聚糖的的相关提取技术，也没有乙醇-酶体系预处理技术报道。

文献：刘钧发,冯梦莹,游丽君,罗维,赵强忠,赵谋明.超声和水提法提取灵芝多糖的结构和抗氧化性的比较研究(食品工业科技,2013)报道了灵芝子实体中多糖的超声和水提法2种提取技术，但均是针对灵芝总多糖的提取技术，没有针对灵芝β-葡聚糖的的相关提取技术，且文中报道了灵芝子实体预处理采用灵芝粉末按料液比1:6(w/v)的比例加入95％乙醇，在微沸的状态下回流3h，未涉及乙醇-酶体系预处理技术。

中国专利：上海市农业科学院，申请号201410293682，提出了一种灵芝多糖及其制备方法。该灵芝多糖的制备方法包括：灵芝子实体进行水提，得到提取残渣；提取残渣进行超微粉碎，得到超细粉；超细粉经过水提醇沉，收集到的沉淀即为灵芝多糖。但研究对象仍是灵芝总多糖，未涉及灵芝β-葡聚糖。

中国专利：武汉苏妃玛索科技有限公司，申请号201310650365.4，提出了一种灵芝多糖的提取方法。它利用灵芝子实体干粉除掉脂肪后，加入到水和甘油组成的提取剂中进行萃取，具有提高萃取效率以及避免了传统方法中采用氯仿、甲醛等有机溶剂或酸碱对环境的污染，但仍是针对总多糖提取的技术，没有具体针对灵芝β-葡聚糖，且未涉及乙醇-酶体系预处理技术。

我们通过大量的实验发现，在灵芝β-葡聚糖提取过程中采取乙醇-酶体系预处理对技术可有效提高灵芝β-葡聚糖的提取效率。由于β-葡聚糖在乙醇溶液中不溶解，因此其分子能够保持完整性。乙醇能去除原材料中的油脂、色素、低聚糖和小分子物质等杂质。另外，为了去除蛋白质这类生物大分子对多糖提取的干扰和提高产品纯度，在一定质量分数的乙醇溶液中，加入适量的蛋白酶可有效除去蛋白类杂质。因此，乙醇-酶体系预处理对于灵芝β-葡聚糖的提取具有良好效果。通过反复实验，获得了一种能显著提高灵芝β-葡聚糖的提取效率、且生产工艺简易的β-葡聚糖提取预处理工艺。

发明内容