[发明专利]一种乙醇-酶体系预处理结合水提法提取灵芝子实体中β-葡聚糖的方法

权利要求书

1.一种乙醇-酶体系预处理结合水提法提取灵芝子实体中β-葡聚糖的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

1)将灵芝子实体粉碎，进行乙醇-酶体系预处理；

2)离心获得预处理后的灵芝子实体滤渣；

3)对预处理后的灵芝子实体滤渣进行热水提取β-葡聚糖，经离心获得含粗β-葡聚糖的上清液；

4)在上清液中加入α-1,4-葡萄糖水解酶对α构型多糖进行处理；

5)产品回收：对α-1,4-葡萄糖水解酶处理液进行醇析，经离心收集沉淀部分即为灵芝β-葡聚糖；

所述步骤1)在乙醇-酶体系预处理反应体系中按照10-15:1L/kg将灵芝子实体加入到质量分数为50-70％的乙醇溶液中，然后加入胰蛋白酶进行酶解：加酶量占灵芝子实体质量的1.0-2.0％，酶活力30000-50000U /g；

所述步骤1)中乙醇-酶体系预处理的pH 7.0-9.0，温度45-50℃，酶解时间30-50min；

所述步骤1)在反应体系中加入乙醇溶液后在100-200rpm/min下机械搅拌20-40min；然后加入胰蛋白酶进行酶解。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中将灵芝子实体粉碎至40-60目。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中在2500-4500r/min下离心10-20min得到预处理后的灵芝子实体滤渣。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)取预处理后的灵芝子实体滤渣，按照15-20:1L/kg加入水，在80-90℃温度下浸提1.5-3.5h；离心收集含β-葡聚糖的上清液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：浸提后在6000-8000r/min下离心5-15min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)在含β-葡聚糖的上清液中加入α-1,4-葡萄糖水解酶处理，酶活力40000-60000U /g，加酶量占灵芝子实体滤渣质量的1.0-2.0％，酶解pH3.5-4.0，酶解温度45-50℃，酶解时间40-60min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤5)在α-1,4-葡萄糖水解酶处理后的溶液中，加入3-4倍体积的工业乙醇，在4-6℃温度下放置10-14h进行醇析，然后在6000-8000r/min下离心8-12min，去除上清，收集的沉淀即为灵芝β-葡聚糖产品。