[发明专利]一种人脐带间充质干细胞规模化制备的方法有效
| 申请号： | 201510454775.0 | 申请日： | 2015-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN105018422B | 公开（公告）日： | 2018-08-28 |
| 发明（设计）人： | 李露莉;张留 | 申请（专利权）人： | 成都恒春之源生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人： | 赵正寅 |
| 地址： | 610000 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 脐带 间充质 干细胞 规模化 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种人脐带间充质干细胞规模化制备的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在无菌条件下分别收集脐带和胎盘；
(2)从脐带中分离提取出hUC-MSC；将胎盘制备成胎盘匀浆液；
(3)hUC-MSC使用含胎牛血清的DMEM/F12进行若干代次体外扩增；
(4)用含胎盘匀浆液的DMEM/F12继续培养若干代次；
(5)消化收集细胞悬液，离心弃去上清液，即获得hUC-MSC原料细胞；
其中，所述胎盘匀浆液的制备方法如下：
(2-1)取胎盘，剥离羊膜，收集绒毛组织，并清洗；
(2-2)将绒毛组织进行匀浆；
(2-3)利用缓冲液重悬匀浆；
(2-4)在-80℃的条件下冻存；
(2-5)在4℃的条件下反复冻融，然后进行低温超声破碎；
(2-6)离心，收集上清液，再对上清液进行过滤，并收集滤液，即得胎盘匀浆液；
并且，所述胎盘与提取hUC-MSC的脐带来源于同一个体。
2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞规模化制备的方法，其特征在于，所述缓冲液为DMEM/F12。
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