[发明专利]PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒及其检测方法与应用有效
| 申请号： | 201510442148.5 | 申请日： | 2015-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN105203760B | 公开（公告）日： | 2017-09-22 |
| 发明（设计）人： | 王红阳;丁劲;刘娜;李晓峰 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574;G01N33/573;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | psmd4 蛋白 elisa 检测 试剂盒 及其 方法 应用 | ||
1.一种PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的肝癌为BCLC 0+A级的早期肝癌，所述的ELISA检测试剂盒包括：
(A)包被有PSMD4抗体的ELISA酶标板，所述的包被抗体为兔抗人PSMD4的多克隆抗体，购自PTG公司，包被抗体工作浓度为2μg/ml；
(B)检测PSMD4抗原的抗体，为小鼠抗人PSMD4的单克隆抗体，购自PTG公司，检测抗体的工作浓度为0.5μg/ml；
(C)酶标二抗，为HRP标记的山羊抗小鼠IgG；
(D)标准蛋白，为重组人PSMD4融合蛋白；
(E)样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、抗体稀释液、显色液和终止液。
2.一种PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的应用是鉴别区分肝癌和甲胎蛋白阳性的肝硬化，所述的ELISA检测试剂盒包括：
(A)包被有PSMD4抗体的ELISA酶标板，所述的包被抗体为兔抗人PSMD4的多克隆抗体，购自PTG公司，包被抗体工作浓度为2μg/ml；
(B)检测PSMD4抗原的抗体，为小鼠抗人PSMD4的单克隆抗体，购自PTG公司，检测抗体的工作浓度为0.5μg/ml；
(C)酶标二抗，为HRP标记的山羊抗小鼠IgG；
(D)标准蛋白，为重组人PSMD4融合蛋白；
(E)样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、抗体稀释液、显色液和终止液。
3.一种PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的应用是PSMD4与AFP联合检测，所述的ELISA检测试剂盒包括：
(A)包被有PSMD4抗体的ELISA酶标板，所述的包被抗体为兔抗人PSMD4的多克隆抗体，购自PTG公司，包被抗体工作浓度为2μg/ml；
(B)检测PSMD4抗原的抗体，为小鼠抗人PSMD4的单克隆抗体，购自PTG公司，检测抗体的工作浓度为0.5μg/ml；
(C)酶标二抗，为HRP标记的山羊抗小鼠IgG；
(D)标准蛋白，为重组人PSMD4融合蛋白；
(E)样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、抗体稀释液、显色液和终止液。
4.根据权利要求1、2或3所述的PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的ELISA检测试剂盒中，ELISA酶标板为96孔的ELISA酶标板。
5.根据权利要求1、2或3所述的PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的ELISA检测试剂盒中，
包被缓冲液，为1×PBS，pH:7.4；
封闭液，为含3％牛血清白蛋白+PBS溶液的封闭液；
ELISA酶标板洗涤液，为含0.05％Tween-20的1×PBS溶液；
抗体稀释液，为1×PBS；
显色液，为3,3′,5,5′-四甲基联苯胺；
终止液，为2mol/L的硫酸溶液。
6.根据权利要求1、2或3所述的PSMD4蛋白的ELISA检测试剂盒在制备肝癌血清学诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的ELISA检测试剂盒中，当样品为血清时，样品稀释液为1×PBS，pH:7.4。
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