[发明专利]毛蕊花苷-金纳米颗粒复合物在治疗人或动物白血病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，毛蕊花苷-金纳米颗粒复合物在治疗人或动物白血病中的应用。

背景技术

癌症是恶性肿瘤的统称。白血病是一种预后较差，死亡率较高的恶性肿瘤疾病，其严重危害人类健康和生命，曾被称为不治之症。急性白血病是病情非常凶险的一种疾病，患急性白血病患者若不经特殊治疗，其生存时间最多只有三个月，若该患者受到感染，或者是颅内出血，必死无疑。白血病治疗的一个重要手段是化疗，大部分病人往往会因白血病细胞的多药耐药而导致化疗无效或逐渐由有效转为无效。

金纳米颗粒(goldnanoparticle,Au)因其独特的结构、催化性能等优点在大多领域得到了广泛应用，在过去的十年，Au已在临床诊断和治疗癌症过程中得到了广泛应用，并且随着纳米技术的不断发展，作为一种有效、安全的药物载体，Au在癌症治疗领域获得越来越多的关注。

《毛蕊花苷对MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡的保护作用》中虽然公开了毛蕊花苷(Verbascoside,VB)能抑制MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡，并且VB对神经细胞的保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平，维持线粒体膜电位的高能状态和抑制Caspase-3的活性有关。然而，上述发明所指向的病症是帕金森病，并没有提及VB对肿瘤细胞特别是人白血病细胞K562的作用。本领域技术人员并不清楚VB是否具有促进肿瘤细胞凋亡进而达到抑制肿瘤生长的作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供毛蕊花苷-金纳米颗粒复合物(VB-Au)在治疗人或动物白血病中的应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

VB-Au在制备治疗人或动物白血病的药物中的应用；优选VB-Au在制备诱导人白血病细胞K562凋亡的药物中的应用。

本发明所述的应用，优选将VB包被Au制备成VB-Au复合物使用。本发明所述的VB-Au复合物可通过现有技术制备。

有益效果：

实验研究表明，同正常对照组(NC)相比，VB或VB-Au复合物均能促使人白血病K562细胞在体内外发生凋亡，但同VB处理组相比，VB-Au在体内外促使人白血病K562细胞发生凋亡的作用更加显著，加之VB-Au复合物成本低、易合成、毒副作用小等，因此VB-Au复合物有望用于制备治疗人或动物白血病药物。

附图说明

图1显示运用电镜鉴定合成的VB-Au复合物。A和C：Au纳米颗粒的扫描电镜图(A)和透射电镜图(C)；B和D：VB-Au的扫描电镜图(B)和透射电镜图(D)。

图2显示电镜观察K562细胞经VB-Au处理48h后，细胞核凝缩及核碎裂情况。A和C：未经处理的K562细胞的透射电镜图(A)和扫描电镜图(C)；B和D：经VB-Au处理的K562细胞的透射电镜图(B)和扫描电镜图(D)。

图3显示经VB-Au处理后K562细胞的凋亡状况。A：未经处理的K562细胞；B，C和D：经VB-Au处理24h(B)，48h(C)及72h(D)后，凋亡的K562细胞量不断增加。

图4显示经Au，VB及VB-Au分别处理K562细胞72h后，MTT检测各组细胞的细胞活力。结果显示，同未经处理的细胞(NC)相比，VB及VB-Au都可明显抑制细胞的活力，而VB-Au抑制细胞活力的作用比VB更显著。

图5显示经Au，VB及VB-Au分别处理K562细胞72h后，流式细胞术检测各组细胞的凋亡。图6为对图5细胞凋亡的定量分析。同样发现，同未经处理的细胞(NC)相比，VB及VB-Au都可显著诱导细胞的凋亡，而VB-Au促使细胞凋亡的作用比VB更显著。

图7显示进一步运用吖啶橙/溴化乙锭染色(AO/EB染色)分析经VB-Au处理的K562细胞的凋亡情况。A和B：K562细胞经VB-Au复合物处理24h前(A)、后(B)的早期凋亡图；C和D：K562细胞经VB-Au复合物处理72h前(C)、后(D)的晚期凋亡图。

图8显示K562细胞经不同组处理后发生凋亡的DNA片段分析图。A：为各组处理24h后的结果；B：为各组处理细胞48h后的结果；C：为各组处理72h后的结果；D：为各组处理0h的图片。其中，泳道1为正常对照组，泳道2为经VB单独处理组，泳道3为经VB-Au复合物处理组。结果显示，VB和VB-Au都可时间依赖性的诱导细胞发生凋亡，然而，同VB处理组相比，VB-Au诱导细胞凋亡的作用更加显著。