[发明专利]一种镍-高密度脂蛋白螯合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种镍‑高密度脂蛋白螯合物及其制备方法和应用，该镍‑高密度脂蛋白螯合物是镍离子与高密度脂蛋白通过巯基或/和半胱氨酸残基螯合而成，可用于制备检测人体镍‑高密度脂蛋白螯合物的试剂。本发明首次证实了镍离子可直接作用于高密度脂蛋白。本发明建立了镍‑高密度脂蛋白螯合物的定性定量检测方法，以检测一个地区人群体内高密度脂蛋白的含量，从而间接反映一个地区镍污染程度以及对人群的健康影响。本发明建立的镍‑高密度脂蛋白螯合物定量检测方法准确度高重、复性好。

技术领域

本发明涉及重金属离子的免疫学检测，具体涉及一种镍-高密度脂蛋白螯合物及其制备方法与应用。

背景技术

脂蛋白(lipoproteins)是蛋白质与脂质结合所形成的一种脂质-蛋白质复合物，按密度分为高密度脂蛋白(high density lipoprotein，简称HDL)、中间密度脂蛋白(intermediate density lipoprotein，简称IDL)、低密度脂蛋白(low densitylipoprotein，简称LDL)、极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein,简称VLDL)、乳糜颗粒(chylomicron，CM)。血液中大约百分之三十的胆固醇是通过高密度脂蛋白从组织细胞中运输到肝脏转化为胆汁酸或通过胆汁排出体外的。高密度脂蛋白由50％的蛋白、30％的磷脂、25％的胆固醇(其中70％为胆固醇酯)、5％的三酰甘油组成。

高密度脂蛋白(简称HDL)是血浆中主要脂蛋白之一，其密度最高，颗粒直径最小，蛋白和脂质含量大致均等的异质性脂蛋白。由50％的蛋白、30％的磷脂、25％的胆固醇(其中70％为胆固醇酯)、5％的三酰甘油组成。

HDL是动脉粥样硬化发生和发展的主要脂类保护因素，其在血清蛋白中有很强的抑制动脉粥样硬化作用，是冠状动脉疾病的重要保护因子，与冠心病危险程度呈负相关。

但是，研究表明高密度脂蛋白胆固醇的数量并不能与心血管疾病的保护程度成正比，因为其中已经发生结构改变的高密度脂蛋白仍然可以测量到但已经丧失正常功能甚至会加重动脉粥样硬化的进展。而高密度脂蛋白胆固醇的数量下降则可显著提示动脉粥样硬化的保护性减弱，因而检测定量血样中HDL对于冠心病具有重要意义，不仅可以用于早期识别动脉粥样硬化的危险性，而且可以作为脂类调节药物治疗过程的检测以及预后评价的指标之一。

镍(Nickel，Ni)与人体的健康息息相关，首先其是人体维持健康所必需的微量元素，其存在于多种氢化酶中，催化氢的氧化还原反应，参与多种酶蛋白的合成和细胞激素及色素的代谢，具有促进铁的吸收和红细胞的增长、激活酶形成辅酶、增强胰岛素、降血糖、保护心血管等作用，因此如果人体缺乏镍，会导致疾病的发生。但是，事实在生活中，由于环境污染，人体内很少缺乏镍，相反镍的含量常常过量，常常导致疾病的发生，甚至危及生命。

然镍螯合于高密度脂蛋白上的机制尚不清楚，两者之间的相互作用及对机体的影响也尚待研究。但是可以明确的，高密度脂蛋白和镍对于机体的作用都至关重要，而定量检测高密度脂蛋白上螯合镍是研究两者相互关系的第一步，其具有重要科研及临床价值。

发明内容

针对镍污染严重的问题，本发明的目的在于提供一种镍-高密度脂蛋白螯合物及其制备方法，并建立镍-高密度脂蛋白螯合物的定性、定量检测方法，以便定量检测镍-高密度脂蛋白螯合物在评价一个地区镍污染程度的应用。通过定量检测一个地区人群血清中镍-高密度脂蛋白螯合物，可以间接反映这个地区人群受镍污染的情况，从而间接反映这个地区镍污染程度。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种镍-高密度脂蛋白螯合物，该镍-高密度脂蛋白螯合物是镍离子与高密度脂蛋白通过巯基或/和半胱氨酸残基螯合而成。

本发明还提供一种上述的镍-高密度脂蛋白螯合物的制备方法，即体外合成法，包括以下步骤：