[发明专利]一种菌体循环利用的葡萄糖酸钠发酵方法

权利要求书

1.一种菌体循环利用的葡萄糖酸钠发酵方法，其特征在于：包括以下步骤：

发酵结束所得的发酵液通过陶瓷膜过滤，过滤清液进入提取工序，菌体浓缩液部分回流至发酵罐，然后加入新鲜培养基进行发酵，按此方法进行菌体循环利用发酵，当发酵速度明显下降时停止循环，再进行新一轮发酵。

2.根据权利要求1所述的菌体循环利用的葡萄糖酸钠发酵方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）发酵：发酵罐（Ⅰ）装入灭菌后培养基，接入培养成熟的种子液进行发酵，直至葡萄糖耗尽发酵结束；

（2）菌体浓缩：采用孔径为100-200nm的陶瓷膜对发酵液进行过滤，过滤清液进入提取工序，当菌体浓缩液体积至总发酵液体积的10-20%时停止过滤，将40-60%的菌体浓缩液泵送至含有新鲜培养基的发酵罐（Ⅱ）内进行葡萄糖酸钠发酵，剩余的菌体浓缩液经板框过滤除菌后进入提取工序；

（3）菌体循环利用发酵：循环步骤（2），当发酵速度下降10-15%时，中止循环，菌体浓缩液全部经板框过滤除菌后进入提取工序；

（4）重复步骤（1）-（3）：开始新一轮菌体循环利用葡萄糖酸钠发酵。

3.根据权利要求2所述的菌体循环利用的葡萄糖酸钠发酵方法，其特征在于：步骤（1）发酵之前，先经菌种扩大培养，所述菌种扩大培养为：一级种子罐培养基灭菌后接入黑曲霉麸曲孢子菌种，培养至成熟，按10-20%接入灭菌后的二级种子罐进行二级扩大培养。

4.根据权利要求2所述的菌体循环利用的葡萄糖酸钠的发酵方法，其特征在于：上述步骤（1）中，种子培养基：葡萄糖150-180g/L，硫酸铵0.2-0.6g/L，磷酸氢二钾0.1-0.5g/L，硝酸铵0.1-0.3g/L，硫酸镁0.1-0.3g/L，种子培养控制条件：培养温度36.0-37.0℃，溶解氧浓度10-20%，pH值=6.0-6.5，种子罐压力0.05-0.15MPa。

5.根据权利要求2所述的菌体循环利用的葡萄糖酸钠的发酵方法，其特征在于：上述步骤（2）中，发酵培养基：葡萄糖270-300g/L，硫酸铵0.2-0.6g/L，磷酸氢二钾0.1-0.5g/L，硝酸铵0.1-0.3g/L，硫酸镁0.1-0.3g/L，发酵过程控制条件：发酵温度37.0-37.5℃，溶解氧浓度20-30%，pH值=5.5-6.0，发酵罐压力0.05-0.15MPa。