[发明专利]PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用

说明书

本发明公开了一种PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用。本发明所提供的应用具体为序列表中序列1所示蛋白质在如下任一中的应用：(a1)制备抑制肝癌细胞迁移的产品；(a2)抑制肝癌细胞迁移。实验证明，PCSK9蛋白的D374Y突变体过表达对HepG2细胞的增殖能力无明显的影响，但是显著抑制细胞的迁移能力；PCSK9蛋白的D374Y突变体对肝癌细胞的迁移能力的抑制是通过Erk信号通路的调控起作用的。本发明对肝癌的治疗具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用。

背景技术

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin-like/kexintype 9，PCSK9)是继LDLR、APOB后被定位的第三个ADH(autosomal dominanthypercholesterolemia)主效基因。该基因由Seidah et al.首次克隆得到，并定义为细胞凋亡调节转化酶1(apoptosis-regulated convertase 1，Narc-1)，指出其在肝再生和神经元分化过程中的潜在作用。PCSK9蛋白主要表达于具有再生和分化能力的细胞中。PCSK9在肝脏的细胞的功能主要表现为对(low-density lipoprotein receptor，LDLR)的翻译后调控作用：PCSK9分泌蛋白能与肝细胞膜上LDLR相结合，介导PCSK9-LDLR复合体的胞内溶酶体降解过程，而不影响LDLR的内吞作用和载脂蛋白B(apolipoprotein B,apoB)的合成，因此PCSK9的高表达或功能获得性突变与动脉粥样硬化疾病有直接的关系。近年来的研究报道显示，PCSK9参与多种细胞功能的调节，如影响肝脏损伤修复、胆固醇运输、细胞凋亡等性状。如果PCSK9基因缺失，肝脏再生能力将显著下降。PCSK9能够促进小肠上皮细胞对胆固醇的吸收能力。PCSK9对细胞凋亡的调控具有组织特异性。在肝脏中，PCSK9能够下调TNF-α通路，抑制肝细胞的凋亡；而在神经细胞中通过作用于载脂蛋白E受体2(apolipoprotein Ereceptor 2，ApoER2)，参与神经凋亡过程，但不完全依赖caspase途径；在内皮细胞中，抑制PCSK9基因的表达可以降低ox-LDL诱导的HUVECs(human umbilical vein endothelialcells)细胞的凋亡效应；在巨噬细胞中PCSK9的表达量与巨噬细胞炎症反应的敏感性正相关，oxLDL诱导THP-1来源的巨噬细胞中PCSK9的表达，而PCSK9的干扰抑制炎症因子的表达，使IkappaB-alpha的降解和NF-kappaB的核转运受到抑制。

综上所述，PCSK9对细胞功能具有重要的调节作用，特别参与肝脏细胞的多种生物学过程。然而，目前的研究报道中未见PCSK9对肝癌细胞迁移影响的相关报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用。

所述PCSK9蛋白的D374Y突变体具体为序列表中序列1所示蛋白质；所述应用具体为在如下任一中的应用：

(a1)制备抑制肝癌细胞迁移的产品；

(a2)抑制肝癌细胞迁移；

(a3)下调Erk蛋白的磷酸化水平。

编码序列表中序列1所示蛋白质的基因(即所述PCSK9蛋白的D374Y突变体的编码基因)在如下任一中的应用也属于本发明的保护范围：

(a1)制备抑制肝癌细胞迁移的产品；

(a2)抑制肝癌细胞迁移；

(a3)下调Erk蛋白的磷酸化水平。

含有所述基因的表达盒、重组载体、转基因细胞系或重组菌在如下任一中的应用也属于本发明的保护范围：