[发明专利]一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂

说明书

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂。

背景技术

猪瘟（CSF）是国际动物卫生组织（OIE）和中国的A类法定传染病，是我国强制性免疫的重大动物疫病之一，是危害我国养猪业的“第一杀手”。猪瘟是由猪瘟病毒引起的，无法用药物进行控制，疫苗免疫是最有效的办法。

目前国内外市售的猪瘟疫苗主要有猪瘟脾淋苗、猪瘟细胞苗以及猪瘟亚单位疫苗，但市场上猪瘟疫苗的主流产品仍然是猪瘟脾淋苗和猪瘟细胞苗。作为疫苗中的经典-精制猪瘟脾淋源活疫苗仍具有不可替代的作用。

猪瘟脾淋源活疫苗选用中国猪瘟兔化弱毒株（C株），该疫苗株能激发机体快速产生免疫力、遗传稳定、毒力不返强，是国际上公认的目前世界上最为安全有效的弱毒疫苗株。采用该毒株接种优良家兔，收获感染家兔的脾脏制成乳剂，与冻干保护剂混匀后经过冷冻真空干燥制成猪瘟脾淋源活疫苗。

目前市场认为猪瘟脾淋源活疫苗免疫效果不理想，对猪瘟脾淋活疫苗的认识仍存在误区，这主要和目前国内猪瘟脾淋源活疫苗使用方法不当、混合感染猪只免疫后应激过大，以及质量参差不齐等情况有关。

近年来，人们针对活疫苗冻干保护剂进行了大量研究，多为耐热保护剂，解决了疫苗在运输使用过程中的耐热问题，但对于提高活疫苗效果方面几乎没有提升。

多糖是中药活性成分之一，大量研究表明，多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，更重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的能力，同时多糖也具有很好的耐热效果，多种实验表明中药多糖可作为耐热保护剂添加于活疫苗冻干保护剂中。

黄酮类化合物是自然界中存在的多元酚类物质，也是自然界药用植物中的主要活性成分之一。它是指具有15个碳原子并以C6-C3-C6的方式构成的三环天然有机物，是植物在长期自然选择中产生的二级代谢产物，现在已分离鉴定的有4000多种。它广泛存在于果蔬、中草药中，无毒副作用，它具有显著的清除机体内自由基、抗老化、抗突变、调血脂降血压等药理保健功能，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂，这些抗氧化活性物质可以减少和清除机体内自由基，具有预防疾病的作用。

法氏囊素(bursin，BS) 是从禽类特有的体液免疫中枢淋巴器官法氏囊(Bursa of fabricius) 中分离出来的一种活性三肽物质，其结构为L-Lys-His-Gly-NH2。研究表明，BS能促进禽类和哺乳动物B淋巴细胞前体的分化、增殖，能提高B细胞系Daudi细胞内第二信使cAMP和cGMP水平，加快B细胞内DNA转录成mRNA的速度，促进B细胞内蛋白质的生成，从而使B细胞产生和分泌抗体能力加强。

基于上述背景技术，本发明提出一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂。该保护剂主要由中药多糖、中药黄酮、法氏囊素等组成。本发明所制备的冻干保护剂一方面可以提供给活疫苗耐热保护，另一方面在疫苗使用过程中大大提高了疫苗的使用效果，同时还兼具了提高机体免疫力的功效。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂的技术方案，该冻干保护剂能够大幅度提高了机体的免疫力，提高体液免疫能力，刺激机体产生高效的中和抗体，提高了机体预防疾病的能力。

所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖30～100g、中药黄酮20～60g、法氏囊素2～16mg，所述的中药多糖和中药黄酮从以下中药组合物中提取得到：垂盆草、金果榄、鸡矢藤、水牛角、蝼蛄、香薷、防己、半边莲和路路通。

所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖50～80g、中药黄酮30～50g、法氏囊素4～12mg。

所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的中药多糖和中药黄酮通过以下步骤制得：

a、按垂盆草10～30份、金果榄20～40份、鸡矢藤10～20份、水牛角10～30份、蝼蛄10～30份、香薷10～20份、防己10～30份、半边莲10～30份和路路通10～20份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；