[发明专利]一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂

权利要求书

1.一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖30～100g、中药黄酮20～60g、法氏囊素2～16mg，所述的中药多糖和中药黄酮从以下中药组合物中提取得到：垂盆草、金果榄、鸡矢藤、水牛角、蝼蛄、香薷、防己、半边莲和路路通。

2.如权利要求1所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖50～80g、中药黄酮30～50g、法氏囊素4～12mg。

3.如权利要求1所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的中药多糖和中药黄酮通过以下步骤制得：

a、按垂盆草10～30份、金果榄20～40份、鸡矢藤10～20份、水牛角10～30份、蝼蛄10～30份、香薷10～20份、防己10～30份、半边莲10～30份和路路通10～20份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀即为粗制中药多糖，上清即为粗制中药黄酮；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解，溶解后，按通过活性炭柱进行内毒素吸附，收集滤出液；

e、将d中上滤出液通过sevag法除去蛋白；

f、将e中中药多糖进行真空冷冻干燥制得中药多糖；

g、将c中粗制中药黄酮进行减压真空浓缩，浓缩物用灭菌注射用水稀释清洗，再次进行减压真空浓缩，如此三次后经冷冻真空干燥制成中药黄酮。

4.如权利要求1所述的一种猪瘟脾淋源活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的法氏囊素通过以下步骤制得：取健康法氏囊组织，将法氏囊组织剔除筋膜和脂肪组织， pH7.2灭菌冷PBS洗净；按1：1比例加入pH 7.2灭菌冷PBS，在组织匀浆机中进行高速匀浆；匀浆液中加入2.5%的胰蛋白酶，反复冻融3次，12000rpm离心20min，弃沉淀；上清用1000da截留分子量的超滤膜进行超滤，膜下液经0.22um滤膜过滤除菌，滤过液即为法氏囊素粗提液；粗提液经冷冻真空干燥制得法氏囊素。