[发明专利]一种灵芪加口服液含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药复方检测方法，具体涉及一种灵芪加口服液含量的检测方法。

背景技术

灵芪加口服液，国家食品药品监督管理局国家药品标准中，WS-11254(ZD-1254)-2002中写明了含量的测定方法为薄层色谱分析方法，其中供试品溶液的制备方法为：精密量取本品30ml，用氯仿振摇提取2次，每次25ml，弃去氯仿液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1cm，长12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按相似相溶原理，氯仿是除去杂质；正丁醇是溶解有效成分；D101型大孔吸附树脂柱为分离载体，起吸附作用，除去杂质。

总体来说，现有技术制备供试品实验步骤中应用氯仿有机试剂，毒性大，费用较高，步骤繁杂，不利于实验研究及药品生产、检验。含量测定方法为薄层色谱分析方法，其精密度、准确性有待提高。

发明内容

本发明的目的是提供一种解决现有技术的测定灵芪加口服液的方法。

本发明提供的一种灵芪加口服液含量的测定方法，包括以下步骤：色谱条件、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备和检测。

所述测定方法中：

色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(30:70)为流动相；用蒸发光散射器检测，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3500；

对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：精密量取灵芪加口服液25-30ml，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次25-30ml，合并正丁醇液，用氨试液20-25ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水20-25ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定：精密吸取对照品溶液2μl、5μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算。

优选地，所述测定方法包括以下步骤：

色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为30:70的乙腈-水为流动相；用蒸发光散射器检测，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3500；

对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：精密量取灵芪加口服液25ml，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液20ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定：精密吸取对照品溶液2μl、5μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算。

本发明提供的检测方法最终检测每1ml灵芪加口服液中黄芪甲苷含量不低于32μg。

本发明提供的检测方法具有以下优点：

1、供试品制备时采用正丁醇提取有效成分，未用氯仿达到了低毒、绿色实验的目的；黄芪甲苷虽分子量较大，但毕竟具苷类性质，必须注意减少损失，萃取及洗涤体积应不宜过大。

2、也有报道，当归补血口服液中黄芪甲苷的检测方法，与本发明非常接近，如CN200910064944.4(公开号为CN101551365A)，但是本发明使用乙腈-水(30:70)做为流动相的检测结果准确度高、相对偏差小；

供试品溶液的制备中萃取的次数少、洗涤时间短、省时、快捷、通过实验结果证明可达到相同结果，得到了同量的有效成分。

2、本发明提供的采用蒸发光色谱仪检测此含量的方法，准确度、精密度、耐用性都符合相应标准，表明方法可行。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1

1、仪器与试药

SEDEX75(法国)，黄芪甲苷对照品，来源：中国药品生物制品检定所，乙腈：为色谱纯，其余为分析纯。

2、色谱条件