[发明专利]水稻OsAHL1基因的启动子及包含其的重组载体、转化体以及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物基因工程领域，具体地说，涉及水稻OsAHL1基因的启动子OsAHL1-p及包含其的重组载体、转化体以及其应用，利用此启动子OsAHL1-p可诱导基因组织特异性表达及改变所启动基因在环境胁迫下的表达量。

背景技术

水稻是农业生产中用水最多的作物，其节水抗旱性对我国的粮食、水和生态安全具有重要意义。利用基因工程这一分子育种技术，将抗旱基因转入当前广泛应用的优良水稻品种中，从而改良其抗旱性，培育即抗旱又高产优质的农作物新品种是抗旱育种的有效途径之一。

发掘抗旱基因是抗旱分子育种的基础。已发表的抗旱相关基因及其蛋白的研究越来越多。广义上的反式转录调节因子包括所有具有调节基因转录功能的蛋白分子，在植物生长和抗逆性方面都发挥了巨大的作用。

OsAHL1是水稻中干旱响应相关基因，其表达受到干旱、高盐以及低温等非生物胁迫的诱导，与非生物胁迫密切相关。关于OsAHL1基因启动子序列的研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供OsAHL1基因的启动子OsAHL1-p。本发明的启动子OsAHL1-p克隆自水稻第11染色体。结合GFP观测及qRT-PCR结果可知，OsAHL1-p可驱动下游基因在水稻中表达，具有启动子活性。主要在水稻根组织以及维管束组织中驱动基因表达，具有一定的组织特异性，且对干旱等非生物逆境胁迫以及ABA等植物激素有响应。

发明人从水稻中分离克隆了OsAHL1基因起始密码子的上游调控区，获得1686bp序列，并命名为启动子OsAHL1-p。

对于从水稻中分离克隆的OsAHL1基因的上游调控区的启动子OsAHL1-p，通过Plant-CARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)分析可知，该启动子中存在多个抗逆相关的顺式作用元件，如ABRE(脱落酸响应顺式作用元件，cis-acting element involved in the abscisic acid responsiveness)，MBS(干旱诱导的MYB结合位点，MYB binding site involved in drought-inducibility)，TCA-element(响应水杨酸反应的顺式作用元件，cis-acting element involved in salicylic acid responsiveness)，TGACG-motif(茉莉酸甲酯响应顺式作用元件，cis-acting regulatory element involved in the MeJA-responsiveness)，这些保守序列的存在预示着该启动子与植物的抗逆性存在密切关系。

本发明采用的技术方案是，提供一种水稻OsAHL1基因的启动子OsAHL1-p，所述启动子OsAHL1-p序列表具有下列核苷酸序列之一：

SEQ ID NO:1中所示的DNA序列；

或与SEQ ID NO:1至少90％同源的DNA序列；

或功能相当于SEQ ID NO:1所示序列的亚片段。

本发明还提供一种包含上述启动子OsAHL1-p的重组载体，构建所述重组载选用的载体为可以引导外源基因在植物中表达的载体，例如所述表达的载体可以为Ti质粒或植物病毒载体。

本发明还提供一种包含启动子OsAHL1-p的转化体，所述转化体的宿主可以为植物，例如所述植物可以为水稻。

本发明还提供上述启动子OsAHL1-p在水稻旱胁迫中的应用。其可以采用下述操作步骤：a)、将所述的启动子驱动目的基因导入水稻细胞、组织或器官；b)、再将转化后的水稻细胞、组织或器官培育成植株，得到驱动目的基因响应干旱胁迫的转基因植物，

本发明还提供权利要求1所述启动子OsAHL1-p在驱动水稻基因特异表达中的应用。其可以采用下述操作步骤：a)、将所述的启动子驱动目的基因导入水稻细胞、组织或器官；b)、再将转化后的水稻细胞、组织或器官培育成植株，得到驱动目的基因在特定的组织部位表达的转基因植株。