[发明专利]生产连续细胞系的方法

权利要求书

1.一种用于将禽类细胞永生化的方法，所述方法包括：

用波长在200nm到300nm之间且剂量为约20mJ/cm²到约105mJ/cm²的UV光辐照分离的禽类原代细胞，其中辐照时间为30秒到4分钟；以及

选择增殖至少20代的细胞作为永生化细胞。

2.权利要求1的方法，其中UV光剂量为至少50mJ/cm²。

3.权利要求1的方法，其中选择增殖至少40代的细胞。

4.权利要求1的方法，其中细胞附着于表面或在悬液中。

5.权利要求1的方法，其中细胞是胚胎的细胞。

6.权利要求1的方法，其中细胞是一种以上类型组织的混合培养物。

7.权利要求1的方法，其中细胞为单层细胞。

8.权利要求1的方法，所述方法还包括在允许病毒增殖的条件下用病毒感染所述细胞。

9.权利要求8的方法，其中所述病毒选自杆状病毒、痘病毒、腺病毒、乳多空病毒、细小病毒、嗜肝DNA病毒、冠状病毒、黄病毒、披膜病毒、星状病毒、小核糖核酸病毒、反转录病毒、正粘病毒、线状病毒、副粘病毒、弹状病毒、沙粒病毒和布尼亚病毒。

10.权利要求8的方法，其中所述病毒选自修饰的痘苗病毒安卡拉(MVA)、蜱媒的脑炎(TBE)病毒、黄热病病毒、西尼罗病毒、新加勒多尼亚病毒或流感病毒。

11.权利要求1的方法，所述方法还包括用编码基因产物的核酸转染所述细胞，以及使所述细胞在允许所述基因产物产生的条件下生长。

12.权利要求1的方法，其中所述细胞适于在无血清培养基中生长。

13.权利要求12的方法，其中所述培养基为DMEM/HAM’sF12、RPMI、MEM、BME、Waymouth培养基、无寡肽培养基、化学成分确知培养基或其组合。

14.权利要求1的方法，其中选择非致瘤和/或非致癌的细胞系的细胞。

15.能通过权利要求1-14任一项的方法获得的永生化细胞系。

16.保藏在欧洲细胞培养物收藏中心(ECACC)的细胞系，保藏登记号为08020602、08020603或08020604。

17.权利要求15的细胞系，其中细胞系的细胞是非致瘤和/或非致癌的。

18.权利要求15的细胞系，其中细胞系的细胞能够在固体表面上或悬液中培养。

19.权利要求15的细胞系，其中细胞系的细胞能够在无血清培养基中培养。

20.权利要求1的方法，其中所述剂量为约70mJ/cm²到约105mJ/cm²。

21.权利要求8的方法，所述方法还包括收集所述病毒。

22.权利要求11的方法，所述方法还包括收集所述基因产物。

23.权利要求1的方法，其中所述永生化细胞是不同类型的。