[发明专利]一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法在审
| 申请号: | 201510128763.9 | 申请日: | 2015-03-23 |
| 公开(公告)号: | CN104771762A | 公开(公告)日: | 2015-07-15 |
| 发明(设计)人: | 许佩佩;王如菊;陈兵;欧阳建 | 申请(专利权)人: | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号: | A61K47/48 | 分类号: | A61K47/48;A61K45/00;A61P35/00 |
| 代理公司: | 北京天平专利商标代理有限公司 11239 | 代理人: | 缪友菊 |
| 地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 携载抗 肿瘤 药物 血小板 体系 制备 方法 | ||
1.一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)环境温度为20±5℃,在全血中加入重量百分含量为2-4%柠檬酸钠溶液,离心后得到血小板丰富血浆;
(2)将步骤(1)得到的血小板丰富血浆再深度离心,并用PBS缓冲液洗涤至不再含有血浆及其他血液成分,得到洗涤血小板;
(3)将步骤(2)得到的洗涤血小板与抗肿瘤药物在37±0.5℃的避光环境中震荡反应1~2小时,得到抗肿瘤药物与血小板反应物;
(4)将步骤(3)得到的抗肿瘤药物与血小板反应物通过琼脂糖凝胶2B分离柱分离,并离心洗涤,得到携载抗肿瘤药物的血小板载药体系。
2.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,全血与重量百分含量为2-4%柠檬酸钠溶液的体积比为7:1~10:1。
3.根据权利要求2所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,全血与重量百分含量为2-4%柠檬酸钠溶液的体积比为9:1。
4.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中离心为以1200rpm离心10-15min。
5.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中深度离心为以3600rpm离心8~12min。
6.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)得到洗涤血小板计数控制在(2.5-3.0)×105/ul。
7.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中抗肿瘤药物为蒽环类抗肿瘤药物、生物碱类抗肿瘤药物或烷化剂类抗肿瘤药物的一种,抗肿瘤药物的浓度为0.05~0.15mmol/L。
8.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中抗肿瘤药物与洗涤血小板的体积比为(1~4):1。
9.根据权利要求8所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中抗肿瘤药物与洗涤血小板的体积比为2:1。
10.根据权利要求1所述的一种携载抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中离心洗涤是用PBS缓冲液以12000rpm离心洗涤2~3次,每次2~4分钟。
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