[发明专利]一种透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明属于纳米载药材料领域，特别涉及一种透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒及其制备和应用。

背景技术

在人类众多疾病发展过程中，存在着严重威胁人类生命健康的重大疾病——肿瘤。在肿瘤的化学药物治疗过程中，影响其治疗效果的关键在于抗癌药物能否到达肿瘤细胞并具有一定的药物浓度，从而达到抑制癌瘤细胞的增殖甚至杀灭癌细胞的目的。然而，大量的药物分子因具有水溶性差、细胞膜渗透率低等缺陷使得治疗效果受到极大限制。因此，构建具有靶向药物输送功能的药物输送体系成为解决该难题的关键。

随着纳米技术的不断发展及大量新型纳米材料的出现，一些功能化纳米材料已经被用作药物传输载体并显示出极大的优势。在众多的抗癌药物载体体系中，以纳米粘土锂皂石作为平台的载药体系正成为目前的研究热点。锂皂石(Laponite,LAP)是属于蒙皂石族的一种矿物，分散在水中能形成扁平状晶体。锂皂石具有特殊空间夹层结构并且表面带有大量的负电荷，可以有效地包载药物，在疏水性药物依曲康唑、抗肿瘤药物阿霉素等的负载与输送中体现了优势。但是，寻找合适的载体还远远不够，许多抗癌药物不能穿过细胞膜，即使药物载体将药物载至肿瘤细胞表面，仍缺乏有效的内化机制。随着对肿瘤细胞研究的深入，研究者发现肿瘤细胞具有一系列过量表达的受体，如果将与受体相关的配体或抗体连接在药物或药物载体表面，通过受体介导的内吞作用能够将所负载的药物靶向转运到特定的组织和肿瘤细胞，这个方法的特异性和对肿瘤细胞的亲和性都非常高，大大提高了药物的靶向性和转运效率。

透明质酸(HA)是由单位D-葡萄糖醛酸和N-乙酰葡糖胺组成的高级多糖，是脊椎动物体液和组织的重要成分，在一些生物过程如创伤修复、细胞增殖、细胞粘附以及细胞迁徙等中扮演重要角色。此外，HA也是一种常用的肿瘤靶向分子，它可以和一些肿瘤细胞表面高表达的CD44受体特异性的结合，被广泛的运用于基因治疗、分子成像以及药物传递等方面。与小分子叶酸等靶向试剂相比，透明质酸分子是一种具有良好水溶性的大分子，修饰到载体的表面不仅能够赋予载体对肿瘤细胞的靶向功能，还能提高载体的胶体稳定性和生物相容性，表现出独特的优势。

因此，利用LAP的自身结构特点负载抗肿瘤药物盐酸阿霉素，再通过表面修饰HA的方式赋予载体靶向性，将有望提高阿霉素的抗肿瘤效果、降低毒副作用，具有重要的理论意义和实用价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒及其制备和应用，该氨基化锂皂石纳米颗粒提高了纳米颗粒的稳定性和生物相容性，同时对CD44受体高表达的癌细胞具有特异性的靶向作用，可应用于靶向输送抗癌药物；制备方法简单，反应条件温和，易于操作，具有产业化实施的前景。

本发明的一种透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒，所述的氨基化锂皂石纳米颗粒为(3-氨基丙基)二甲基乙氧基硅烷修饰的锂皂石，纳米颗粒中透明质酸的质量分数为17.17-19.09％。

本发明的一种透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒的制备方法，包括：

(1)用溶剂溶解透明质酸HA，加入活化剂搅拌，活化羧基2-4h，得到HA溶液；

(2)配置锂皂石LAP分散液，取(3-氨基丙基)二甲基乙氧基硅烷加入到LAP分散液中，然后50～60℃静置14-18h，透析，制得氨基化锂皂石LM溶液；

(3)取(1)中所得的HA溶液，加入步骤(2)所得LM溶液中，搅拌反应70-74h后，透析，最后得到透明质酸修饰的氨基化锂皂石纳米颗粒LM-HA。

所述步骤(1)中的溶剂为超纯水；HA溶液的浓度为25-27mg/mL。

所述步骤(1)中的活化剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺EDC和N-羟基丁二酰亚胺NHS，EDC、NHS与羧酸的摩尔比为5:5:1。

所述步骤(2)中的LAP分散液的浓度为8-10mg/mL，LAP和(3-氨基丙基)二甲基乙氧基硅烷的质量比为2-3:1。

所述步骤(3)中的LM与HA的摩尔比为1:1.25-1:1.5。

所述步骤(1)和(3)中的搅拌为磁力搅拌，搅拌速度为100-150r/min。

所述步骤(2)和步骤(3)中的透析为蒸馏水透析，透析袋截留分子量为8000-14000，透析时间为3d。