[发明专利]一种当归酸性多糖组分及其提取方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种当归酸性多糖组分、提取方法，及其在制备抗癌、增强免疫、抗辐射损伤药物中的应用，属于中药现代化领域。

背景技术

当归为伞形科植物Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根，为著名常用中药，有补血活血、润肠调经之功效。国内外学者应用现代提取分离、含量测定方法对当归的化学成分进行了分析研究，发现当归的主要有效成分为多糖和挥发油等。近二十年来，由于分子和细胞生物学的发展，人们逐渐认识到多糖及其复合物具有极为重要的生物功能。研究发现，当归多糖具有抗血栓及改善血液流变、保护心血管系统、抑菌、抗肿瘤、增强免疫、抗消化道溃疡、抗辐射损伤、保护肺部组织细胞、利胆保肝、补血等生物活性[Jin等，Isolation,structure and bioactivities of the polysaccharides from Angelica sinensis(Oliv.)Diels:a review.Carbohydrate Polymers,2012；89(3):713-722]，具有开发成为新药和功能性食品的潜力。

多糖是由10个或10个以上单糖基通过糖苷键连接而成的直链或支链的聚糖。根据单糖组成的不同，多糖可以分为均多糖和杂多糖。自然界中单糖种类有200多种，而且每种单糖同时又分为D-系列和L-系列两类构型，在聚合成多糖时，它们可以通过多种不同的结合位点连接。目前已知的多糖结构中，除单糖基之外，还含有糖醛酸、氨基糖、糖醇等，并且有其他取代基，如：O-乙酰基、N-乙酰基、磺酸基等。这些基团的取代，增加了多糖结构的复杂性，而多糖的活性与其结构性质关系密切。

目前当归多糖的提取分离方法主要报道如下：

丁虹报道了[当归多糖组合物及其制备方法，专利号ZL03118481.2]将当归用水提取，乙醇两次沉淀、离心得多糖的方法。刘娟等[当归多糖的分离纯化及其部分理化性质的研究.华西药学杂志.2004,19(6):412-414]报道了将新鲜当归粉碎后脱去表面油脂，用水煎煮1小时，浓缩、65％乙醇沉淀，等电点沉淀法除蛋白，即加碱溶液调pH10～11，放置过夜，抽滤，滤液用酸溶液调pH5～6，再抽滤，滤液用85％乙醇沉淀，醇沉物进一步用Sevag法去蛋白，冷冻干燥即得当归多糖。张新国等[当归多糖的酶法提取新工艺研究.中医药学报.2012,40(3):96-100]报道了将当归粉用含0.4mg/mL纤维素酶的水(pH＝5.0)60℃提取4小时，100℃灭活酶后，浓缩，Sevag法去蛋白，冷冻干燥即得当归多糖。彭仁琇等[一种从制备当归注射液的废弃物中提取当归多糖的方法，专利号ZL03118537.1]报道了将制备当归注射液所得的醇沉物，加水溶解，0～10℃静置后过滤，去沉淀，浓缩后加入无水乙醇，多次静置、沉淀后得当归多糖的方法。金汝城等[当归多糖制备工艺的研究.中成药.2007,29(8):1146-1150]将脱脂后的当归采用10倍水溶液微波辐射萃取法3次，每次4min提取当归多糖，进一步纯化时采用传统醇沉法。尚京川等[当归多糖的分离提取工艺及其应用，专利申请号201410097326.0]将当归粗粉直接用水提取，提取液浓缩后用95％乙醇沉淀得粗多糖，加饱和氢氧化钙除蛋白，分别经过强酸性阳离子交换树脂和强碱性阴离子交换树脂处理除去酸、碱性物质，透析后浓缩得当归多糖(主要为中性多糖)。可见：目前的当归多糖提取均采用沸水回流提取(100℃)和恒温(70～80℃)水浴提取的方法；辅助提取手段包括采用超声波、微波等技术，采用Sevag法和等电点沉淀法除蛋白，离子交换树脂除酸、碱性杂质。多糖的提取方法对于后续多糖分离及得到的多糖结构和理化特性有重要的影响。

目前报道的多糖分离方法及得到的多糖结构和理化特性如下：

张林维等[张林维，等.当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究.生物学杂志,1998,15(3):12-14；张林维，黄汝多.当归水溶性多糖级份AS-Ⅲa和AS-Ⅲb的纯化鉴定和结构研究.激光生物学报,1999,8(2):123-126]将当归进行热水提取、乙醇分级沉淀、DEAE纤维素和SephadexG-150柱层析处理后得到了两个组分：多糖AS-Ⅲa和AS-Ⅲb，AS-Ⅲa是由α(1→3)葡萄糖连接而成的分子量为85kD的葡聚糖，AS-Ⅲb是由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖以10:10:4的比例组成的分子量为49kD的聚糖。